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細(xì)胞培養(yǎng)中包被液您了解多少?
在培養(yǎng)原代細(xì)胞時為了促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁需要對使用的T-25/T-75等耗材進(jìn)行包被處理,常用的包被液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠,其中ScienCell研究實驗室研發(fā)的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。
其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物,是帶正電荷的氨基酸,通過改變培養(yǎng)基質(zhì)表面的電極來促進(jìn)細(xì)胞貼壁。在細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛用于包被物促進(jìn)細(xì)胞貼壁。除了促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長,包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細(xì)胞的存活率和促進(jìn)神經(jīng)突長出。Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸(PLL,貨號0403)是原液,分子量是70000~150000。包被液多聚賴氨酸以1-2 ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。可將1mg/ml的包被液多聚賴氨酸以滅菌雙蒸水稀釋100倍,T-75培養(yǎng)瓶中加入10ml左右,37度孵箱1小時或4度冰箱過夜,用包被液包被好的培養(yǎng)瓶不要放置超過24小時,包被液可重復(fù)使用2-3次,注意不要污染。
包被液纖維粘連蛋白是分子量為440-500kDa的糖蛋白,存在于細(xì)胞表面蛋白和血漿中。它于細(xì)胞膜表面受體和細(xì)胞外基質(zhì)成分結(jié)合。ScienCell實驗室的包被液牛血漿纖維粘連蛋白(BPF,貨號8248)使用親和色譜法提純自牛血漿,是促進(jìn)細(xì)胞貼壁和延伸生長的理想基質(zhì)。推薦包被濃度是2 μg/cm2。如果想達(dá)到*jia效果取決于細(xì)胞類型。
包被液明膠是來自于膠原的高分子量水溶蛋白混合物。0.2%的包被液明膠溶液用于包被培養(yǎng)器皿以促進(jìn)細(xì)胞貼壁。推薦用于分化的人胚胎干細(xì)胞,某些原代細(xì)胞和永生化細(xì)胞。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司