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遠(yuǎn)慕生物:溶血試驗的原理及注意事項
溶血試驗是國標(biāo)中規(guī)定的一種對細(xì)菌進(jìn)行篩選鑒定的方法。常用于鏈球菌、弧菌、白喉桿菌等的區(qū)分鑒定。
基本原理
不少細(xì)菌都能產(chǎn)生溶血素,可以溶血平板,因此在這些細(xì)菌周圍會出現(xiàn)溶血環(huán)。不同細(xì)菌產(chǎn)生的溶血素不同,比如:
溶血素類型 | 溶血素類型 | ||
產(chǎn)氣莢膜梭菌 | 卵磷脂酶 | 肺炎球菌 | 肺炎溶素 |
溶血性鏈球菌 | 鏈球菌溶血素 O/S | 葡萄球菌 | α、β、γ、δ、ε溶血素 |
破傷風(fēng)桿菌 | 破傷風(fēng)溶素 | 李斯特菌 | 溶血素 O |
其中α溶血:又稱草綠色溶血,菌落周圍培養(yǎng)基出現(xiàn) 1~2 mm 的草綠色環(huán),為高鐵血紅蛋白所致,α溶血環(huán)中的紅細(xì)胞未完全溶解?尚纬α-溶血環(huán)的細(xì)菌如甲型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌。
β溶血是細(xì)菌在血平板上培養(yǎng)時,菌落周圍形成的寬大(2~4 mm)、界限分明、完全透明的溶血環(huán)。β溶血環(huán)中的紅細(xì)胞完全溶解,是細(xì)菌產(chǎn)生的溶血素使紅細(xì)胞完全溶解所致,又稱完全溶血。可形成β溶血環(huán)的細(xì)菌如乙型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等。
γ溶血:又稱不溶血。菌落周圍培養(yǎng)基出現(xiàn)灰白色細(xì)小菌落,在菌落周圍無溶血環(huán)。可形成的細(xì)菌為丙型鏈球菌。
試驗方法:
由于不同細(xì)菌所產(chǎn)的溶血素不同,因此做溶血試驗時對應(yīng)的實驗條件和試驗方法也不一樣,下面就簡單的介紹一下:
1. 鏈球菌溶血試驗:用羊血懸液,37 攝氏度下培養(yǎng)較短時間即可觀察到溶血現(xiàn)象。
2. 白喉桿菌:用含兔血成分的培養(yǎng),需隔夜培養(yǎng)。
3. 弧菌溶血試驗:用無菌脫纖維山羊血培養(yǎng)基,37 攝氏度下培養(yǎng) 1 天,全部或大部分紅血球被溶解方可判定為陽性。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司