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動(dòng)物血清的保存方法有哪些
點(diǎn)擊次數(shù)：510 發(fā)布時(shí)間：2018/11/16 12:01:39
動(dòng)物血清對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用，在內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶、血清中含有抗蛋白酶成分起到中和作用。不僅如此，血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖x解毒中起重要作用。可以說(shuō)，動(dòng)物血清的用途是特別的廣泛！在很多的科研實(shí)驗(yàn)中都會(huì)經(jīng)常使用到，我們?cè)撊绾芜M(jìn)行保存呢？
動(dòng)物血清保存方法：
1，需求長(zhǎng)時(shí)間保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超越1個(gè)月，由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)添加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留必定體積空間,否則易發(fā)作污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>
2，熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已徹底凍結(jié)的血清，加熱過(guò)程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻，此熱處理的意圖是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活，除非有必要,一般不主張作此熱處理,由于熱處理會(huì)形成血清沉積物明顯增多,并且還會(huì)影響血清的質(zhì)量，補(bǔ)體參加反響有:細(xì)胞毒效果, 滑潤(rùn)肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板開(kāi)釋組胺, 增強(qiáng)吞噬效果, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)作化學(xué)趨化和活化。
3，瓶裝血清凍結(jié)需選用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室溫,待全部溶解后再分裝，在溶解過(guò)程中需不斷悄悄搖晃均勻(當(dāng)心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發(fā)作，切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié),這樣因溫度改動(dòng)太大,簡(jiǎn)單形成蛋白質(zhì)凝聚而呈現(xiàn)沉積。
4，一般廠商供給的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌，如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清參加培養(yǎng)液內(nèi)一同過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
5，動(dòng)物血清中的沉積物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結(jié)后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量，可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理， 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":通過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉積物的形成會(huì)明顯增多，有些沉積物在顯微鏡下調(diào)查象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染，一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果置疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,替換另一批號(hào)的血清。
6，切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,一起血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。
動(dòng)物血清保存方法：
1，需求長(zhǎng)時(shí)間保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超越1個(gè)月，由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)添加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留必定體積空間,否則易發(fā)作污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>
2，熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已徹底凍結(jié)的血清，加熱過(guò)程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻，此熱處理的意圖是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活，除非有必要,一般不主張作此熱處理,由于熱處理會(huì)形成血清沉積物明顯增多,并且還會(huì)影響血清的質(zhì)量，補(bǔ)體參加反響有:細(xì)胞毒效果, 滑潤(rùn)肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板開(kāi)釋組胺, 增強(qiáng)吞噬效果, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)作化學(xué)趨化和活化。
3，瓶裝血清凍結(jié)需選用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室溫,待全部溶解后再分裝，在溶解過(guò)程中需不斷悄悄搖晃均勻(當(dāng)心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發(fā)作，切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié),這樣因溫度改動(dòng)太大,簡(jiǎn)單形成蛋白質(zhì)凝聚而呈現(xiàn)沉積。
4，一般廠商供給的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌，如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清參加培養(yǎng)液內(nèi)一同過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
5，動(dòng)物血清中的沉積物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結(jié)后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量，可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理， 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":通過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉積物的形成會(huì)明顯增多，有些沉積物在顯微鏡下調(diào)查象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染，一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果置疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,替換另一批號(hào)的血清。
6，切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,一起血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。
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