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影響培養(yǎng)基滅菌效果的六大因素
培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,現(xiàn)配現(xiàn)用。
影響培養(yǎng)基滅菌效果的六大因素
1. 營養(yǎng)成分的保持
濕熱滅菌時(shí),微生物被殺死的同時(shí),培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng),造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。
2. 微生物的耐熱性
細(xì)菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時(shí)間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時(shí)間。
3. pH值
對(duì)微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時(shí),微生物*不易死亡。pH<6.0時(shí),微生物比較容易死亡,此時(shí)H+很容易滲入微生物的細(xì)胞,從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng),促使其死亡。所以培養(yǎng)基的pH越低,所需的時(shí)間也越短。
4. 培養(yǎng)基成分
油脂、糖類及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會(huì)包于細(xì)胞的周圍形式一層薄膜、影響熱的傳導(dǎo)。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。例如:大腸桿菌在水中加熱至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加熱4-6分鐘才死亡,在30%糖液中需30分鐘才死亡。
5. 泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,殺死其中的雜菌。
6. 顆粒
顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。對(duì)于含有少量較大顆粒及粗纖維的培養(yǎng)基,可用粗濾的方法(不應(yīng)影響培養(yǎng)基質(zhì)量)予以除去,培養(yǎng)基結(jié)塊會(huì)造成培養(yǎng)基滅菌的不徹底。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司