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細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)問深,免費(fèi)秘籍等你拿哦!

點(diǎn)擊次數(shù):487 發(fā)布時(shí)間:2018/10/22 13:40:42

細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中*基礎(chǔ)、也是*常用的實(shí)驗(yàn)手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實(shí)驗(yàn),在每一次細(xì)胞培養(yǎng)的過程中小編都是精心呵護(hù),小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護(hù)你一世周全!可是可是̷̷無數(shù)次細(xì)胞都因污染而離我而去,投入的不只是小編貌美如花的青春,還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費(fèi)!


 

       在眾多污染物中,就屬支原體*狡猾了,他*善于隱藏自己,因?yàn)楸恢гw污染的細(xì)胞不會(huì)馬上死亡,但會(huì)改變細(xì)胞的新陳代謝,甚至?xí)淖兗?xì)胞的基因表達(dá)譜,小編就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓小編就是個(gè)看“顏值”的花癡了?墒切【幫ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗(yàn)中總結(jié)出來,當(dāng)你的細(xì)胞出現(xiàn)了這些癥狀時(shí):生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低̷̷。那你就得千萬小心了,也許你的細(xì)胞已經(jīng)被支原體欺凌了!


 

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什么是支原體?

       支原體是一類能夠自我復(fù)制的*小的原核生物,直徑為0.1~0.3μm,無細(xì)胞壁,呈現(xiàn)高度多形性,有球形、桿形、絲狀和分支狀等多種形態(tài),可透過一般過濾膜且對(duì)抗生素有耐藥性,是原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞的常見污染物。


 

支原體污染的細(xì)胞有哪些癥狀?

       細(xì)胞生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細(xì)胞蘇后存活率降低......然而,支原體污染的細(xì)胞不會(huì)馬上死亡,但會(huì)改變細(xì)胞的新陳代謝,甚至?xí)淖兗?xì)胞的基因表達(dá)譜......然后的然后,細(xì)胞已面目全非,不再是原來那株細(xì)胞了,嚴(yán)重時(shí)則會(huì)徹底摧毀一株細(xì)胞!隨之而來的問題就是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不重復(fù),實(shí)驗(yàn)結(jié)差,甚至實(shí)驗(yàn)做不出。正常的細(xì)胞支原體污染的細(xì)胞




 

支原體污染有哪些來源?

       典型的支原體污染的來源包括細(xì)胞間交叉污染、工作環(huán)境或?qū)嶒?yàn)器材的污染、操作者本身(一些支原體是人體的正常菌群)或無菌操作不佳、培養(yǎng)基、血清或其他試劑污染和制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。因?yàn)橹гw污染不易被察覺,所以,定期對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行支原體污染檢測(cè)以及對(duì)環(huán)境支原體污染進(jìn)行預(yù)防已經(jīng)是每個(gè)細(xì)胞培實(shí)驗(yàn)室所必備的。


 

支原體檢測(cè)方法有哪些?

       目前,檢測(cè)支原體污染的方法有很多種,包括直接培養(yǎng)法、dna熒光染色法、酶學(xué)檢測(cè)法、探針法和pcr法等。其中,培養(yǎng)法需要的時(shí)間較長,敏感性較低,其敏感性依賴于培養(yǎng)基的成分和各成分含量;酶學(xué)檢測(cè)法和探針法操作較為繁瑣,涉及額外的細(xì)胞培養(yǎng)或特殊的儀器設(shè)備;dna熒光染色檢測(cè)法相對(duì)更簡(jiǎn)單,但容易出現(xiàn)假陽性果。pcr檢測(cè)法能特異性擴(kuò)增支原體dna,因高敏感性及簡(jiǎn)單快捷的特點(diǎn)簡(jiǎn)化了支原體污染的檢測(cè)流程,而被廣泛采用。


 

重點(diǎn)來了,細(xì)胞被支原體污染了,怎么辦?

       首先,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體檢測(cè),以確定細(xì)胞是否被支原體污染。如果,檢測(cè)結(jié)果是陰性,我們建議您做好支原體預(yù)防工作。如果,檢測(cè)結(jié)果是陽性,只要細(xì)胞能買到,我們都建議您扔掉已被支原體污染的細(xì)胞,以免污染其他細(xì)胞,同時(shí)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)室及周圍環(huán)境進(jìn)行支原體去除處理;如果是自建細(xì)胞系,或者無法通過購買渠道獲得的,我們建議您先對(duì)細(xì)胞采取支原體去除措施,然后再采取預(yù)防策略。我們建議您不定期的對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)室、培養(yǎng)箱、生物安全柜和超凈工作臺(tái)等處做消毒除菌處理,以防止支原體污染發(fā)生。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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