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蛋白胨的制備方法你了解多少呢?
點擊次數(shù)：471 發(fā)布時間：2018/9/12 16:11:10
蛋白胨是一種由水解程度不同的胨、多肽和氨基酸組成的混合物，由蛋白質(zhì)水解而制得的產(chǎn)品。各種動植物蛋白質(zhì)也均可用于制取蛋白胨。生產(chǎn)蛋白胨的常用原料是畜骨, 但是可供生產(chǎn)蛋白胨的原料甚多: 屠宰場提供的牲畜血液；水產(chǎn)品加工廠提供的魚類臟器；生化藥廠提取臟器藥物后的殘渣；膠廠生產(chǎn)明膠后的膠渣；骨粒生產(chǎn)廠的蒸骨水以及魚粉等, 均可作為蛋白臟生產(chǎn)的原料。但魚肉蛋白質(zhì)的氨基酸種類比較齊全，有利于微生物的生長，是制取蛋白胨的重要原料。蛋白胨為微生物培養(yǎng)基的必要成分，廣泛應(yīng)用于抗菌素、氨基酸、酶、核酸等發(fā)酵工業(yè)、生物化工及生物試劑。生化試劑級產(chǎn)品主要用于科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)化驗、商品檢驗等。按照蛋白質(zhì)來源的不同分為動物蛋白胨、植物蛋白胨、微生物蛋白胨等，不同蛋白胨組成的培養(yǎng)基對微生物的培養(yǎng)效果有顯著的差別。根據(jù)用途不同，蛋白胨制品可分為生化試劑蛋白胨、工業(yè)蛋白胨和生化試劑蛋白胨三大類。
生產(chǎn)蛋白胨的方法很多，有酸、堿水解法，酶水解法和高壓水解法。
(1) 原料 蛋白質(zhì)含量高的動植物組織都是生產(chǎn)蛋白胨極好的原料。國內(nèi)生產(chǎn)的蛋白胨大多都是利用罐頭廠、肉類加工廠生產(chǎn)罐頭及肉制品時剩下的骨頭及筋膜，水產(chǎn)加工廠生產(chǎn)魚片時處理下來的魚排骨、低值小雜魚和魚粉，榨油廠生產(chǎn)油脂時剩下的豆餅等 (可生產(chǎn)植物性蛋白胨) 作原料。
在生產(chǎn)蛋白胨時，必須將原料中的脂肪組織除去，以防其影響后續(xù)工序的進(jìn)行和產(chǎn)品質(zhì)量。
(2) 水解 將新鮮小雜魚1 000kg投入帶攪拌器的耐酸堿的反應(yīng)鍋中，加熱悶煮1h。放冷至45℃加氨水調(diào)節(jié)pH至8～9，加入絞碎的凍解豬胰臟125kg，溫度保持在45℃，連續(xù)水解7h，之后再升溫至50℃，繼續(xù)水解2h，水解基本完成。在水解過程中要經(jīng)常攪拌。
看水解是否完成時，可取水解液少許，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH至 0.5，煮沸過濾，取濾液5ml，加入飽和硫酸鋅溶液20ml，如有少量絮狀物沉淀，則表示水解已經(jīng)完成; 若有大量絮狀物產(chǎn)生，則表示水解尚不完全，需要繼續(xù)水解。
(3)排氨、中和 水解完成后，將反應(yīng)鍋密閉，加熱至110～ 115℃，開啟放氣閥，放氣排氨2～2.5h。排氨結(jié)束后，在保持微沸的狀態(tài)下，緩慢加入冰乙酸，調(diào)節(jié)水解液pH至5.5左右。加熱煮沸15min，冷卻，靜置12h。虹吸上層清液，用尼龍袋過濾，收集濾液。在過濾殘渣中再加入為殘渣量2倍的清水，加熱煮沸 15min，過濾。將二次濾液合并。
(4) 除酪氨酸及雜質(zhì) 將上述濾液泵入濃縮鍋內(nèi)，在真空度不低于90kPa，溫度不高于80℃，濃縮至粘稠狀時，放入桶內(nèi)，送至0℃以下的冷庫中放置48h，使?jié)饪s液中的酪氨酸和脂肪析出。將經(jīng)過冷處理的濃縮液除去上浮的脂肪層后，加水稀釋至12°Bé，再以離心機(jī)離心除去酪氨酸，離心液再以減壓過濾的方法過濾至澄清。
(5) 除堿性蛋白質(zhì) 將濾液泵入高壓鍋內(nèi)，用氨水調(diào)pH至 9.2，加熱至120℃保持10min，用水冷卻至10℃，減壓過濾，除去堿性蛋白質(zhì)。除去堿性蛋白質(zhì)后的濾液必須澄清。
(6)濃縮、干燥 將過濾液加熱使之微沸，待濃縮至15°Bé時為止。濃縮液用接觸式真空干燥箱或噴霧干燥器進(jìn)行干燥。用真空干燥箱進(jìn)行干燥的優(yōu)點是： 干燥在低溫下進(jìn)行，可以防止物料過熱，被空氣污染的程度較低。其缺點是不能連續(xù)生產(chǎn)，勞動強(qiáng)度較大，產(chǎn)品顏色較深。噴霧干燥的優(yōu)點是： 干燥速度快，能連續(xù)自動生產(chǎn)，勞動強(qiáng)度低，產(chǎn)品色澤淡。其缺點是：設(shè)備投資大，能源消耗高。噴霧干燥時，必須將料液預(yù)熱后再進(jìn)行噴霧干燥，排出料液中的空氣，使組織緊密呈重粉，否則產(chǎn)品體積增大，影響產(chǎn)量。
(7) 包裝 真空干燥的蛋白胨呈塊狀，用球磨機(jī)磨粉后再進(jìn)行包裝; 噴霧干燥的蛋白胨呈粉狀，可直接用棕色玻璃瓶或塑料瓶進(jìn)行包裝。
生產(chǎn)蛋白胨的方法很多，有酸、堿水解法，酶水解法和高壓水解法。
圖1為生產(chǎn)工藝流程
工藝操作(1) 原料 蛋白質(zhì)含量高的動植物組織都是生產(chǎn)蛋白胨極好的原料。國內(nèi)生產(chǎn)的蛋白胨大多都是利用罐頭廠、肉類加工廠生產(chǎn)罐頭及肉制品時剩下的骨頭及筋膜，水產(chǎn)加工廠生產(chǎn)魚片時處理下來的魚排骨、低值小雜魚和魚粉，榨油廠生產(chǎn)油脂時剩下的豆餅等 (可生產(chǎn)植物性蛋白胨) 作原料。
在生產(chǎn)蛋白胨時，必須將原料中的脂肪組織除去，以防其影響后續(xù)工序的進(jìn)行和產(chǎn)品質(zhì)量。
(2) 水解 將新鮮小雜魚1 000kg投入帶攪拌器的耐酸堿的反應(yīng)鍋中，加熱悶煮1h。放冷至45℃加氨水調(diào)節(jié)pH至8～9，加入絞碎的凍解豬胰臟125kg，溫度保持在45℃，連續(xù)水解7h，之后再升溫至50℃，繼續(xù)水解2h，水解基本完成。在水解過程中要經(jīng)常攪拌。
看水解是否完成時，可取水解液少許，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH至 0.5，煮沸過濾，取濾液5ml，加入飽和硫酸鋅溶液20ml，如有少量絮狀物沉淀，則表示水解已經(jīng)完成; 若有大量絮狀物產(chǎn)生，則表示水解尚不完全，需要繼續(xù)水解。
(3)排氨、中和 水解完成后，將反應(yīng)鍋密閉，加熱至110～ 115℃，開啟放氣閥，放氣排氨2～2.5h。排氨結(jié)束后，在保持微沸的狀態(tài)下，緩慢加入冰乙酸，調(diào)節(jié)水解液pH至5.5左右。加熱煮沸15min，冷卻，靜置12h。虹吸上層清液，用尼龍袋過濾，收集濾液。在過濾殘渣中再加入為殘渣量2倍的清水，加熱煮沸 15min，過濾。將二次濾液合并。
(4) 除酪氨酸及雜質(zhì) 將上述濾液泵入濃縮鍋內(nèi)，在真空度不低于90kPa，溫度不高于80℃，濃縮至粘稠狀時，放入桶內(nèi)，送至0℃以下的冷庫中放置48h，使?jié)饪s液中的酪氨酸和脂肪析出。將經(jīng)過冷處理的濃縮液除去上浮的脂肪層后，加水稀釋至12°Bé，再以離心機(jī)離心除去酪氨酸，離心液再以減壓過濾的方法過濾至澄清。
(5) 除堿性蛋白質(zhì) 將濾液泵入高壓鍋內(nèi)，用氨水調(diào)pH至 9.2，加熱至120℃保持10min，用水冷卻至10℃，減壓過濾，除去堿性蛋白質(zhì)。除去堿性蛋白質(zhì)后的濾液必須澄清。
(6)濃縮、干燥 將過濾液加熱使之微沸，待濃縮至15°Bé時為止。濃縮液用接觸式真空干燥箱或噴霧干燥器進(jìn)行干燥。用真空干燥箱進(jìn)行干燥的優(yōu)點是： 干燥在低溫下進(jìn)行，可以防止物料過熱，被空氣污染的程度較低。其缺點是不能連續(xù)生產(chǎn)，勞動強(qiáng)度較大，產(chǎn)品顏色較深。噴霧干燥的優(yōu)點是： 干燥速度快，能連續(xù)自動生產(chǎn)，勞動強(qiáng)度低，產(chǎn)品色澤淡。其缺點是：設(shè)備投資大，能源消耗高。噴霧干燥時，必須將料液預(yù)熱后再進(jìn)行噴霧干燥，排出料液中的空氣，使組織緊密呈重粉，否則產(chǎn)品體積增大，影響產(chǎn)量。
(7) 包裝 真空干燥的蛋白胨呈塊狀，用球磨機(jī)磨粉后再進(jìn)行包裝; 噴霧干燥的蛋白胨呈粉狀，可直接用棕色玻璃瓶或塑料瓶進(jìn)行包裝。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
