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如何正確保存豚鼠血清
點擊次數(shù)：541 發(fā)布時間：2017/12/11 16:04:43
如何正確保存豚鼠血清？保存豚鼠血清的注意事項！
在說到這個問題前，我們很有必要先認識一下什么是動物血清？
一，動物血清簡介：
動物血清是指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞的起到某些保護作用。
對于科研人員來說，會經(jīng)常使用到各種動物的血清血漿，比如*常見的血清有：馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、 狗血清、兔血清、山羊血清、特級新生牛血清、優(yōu)級新生牛血清綿羊血清、大鼠血清、小鼠血清、人血清、雖然動物血清的種屬很多，但在市場上對于如何選購正品動物血清也是一件比較頭痛的事！
今天由我們先詳細講述一下如何正確保存豚鼠血清！
二，保存豚鼠血清方法：
1.將豚鼠血清應冷藏或冷凍保存。
2.采集樣品后，如果能在短時間內(nèi)送達實驗室，則可以放在4°C左右的容器中運送；需長期保存的，將血清臵于-20°C冷凍。
3.2-8°C條件下，血清可保存15d；-15°C以下可保存2年。
4.解凍 血清不宜反復凍融。
5.反復凍融會使血清中的脂蛋白和纖維蛋白變性，導致出現(xiàn)絮狀沉淀物（影響血清抗體效價）。
6.拭子樣品應保存在PBS液中，冷凍保存。
三，保存豚鼠血清注意事項：
2.熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
3.瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
5.血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。
在說到這個問題前，我們很有必要先認識一下什么是動物血清？
一，動物血清簡介：
動物血清是指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞的起到某些保護作用。
對于科研人員來說，會經(jīng)常使用到各種動物的血清血漿，比如*常見的血清有：馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、 狗血清、兔血清、山羊血清、特級新生牛血清、優(yōu)級新生牛血清綿羊血清、大鼠血清、小鼠血清、人血清、雖然動物血清的種屬很多，但在市場上對于如何選購正品動物血清也是一件比較頭痛的事！
今天由我們先詳細講述一下如何正確保存豚鼠血清！
二，保存豚鼠血清方法：
1.將豚鼠血清應冷藏或冷凍保存。
2.采集樣品后，如果能在短時間內(nèi)送達實驗室，則可以放在4°C左右的容器中運送；需長期保存的，將血清臵于-20°C冷凍。
3.2-8°C條件下，血清可保存15d；-15°C以下可保存2年。
4.解凍 血清不宜反復凍融。
5.反復凍融會使血清中的脂蛋白和纖維蛋白變性，導致出現(xiàn)絮狀沉淀物（影響血清抗體效價）。
6.拭子樣品應保存在PBS液中，冷凍保存。
三，保存豚鼠血清注意事項：
1.需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2.熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
3.瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
5.血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
