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  • 會(huì)員類型:免費(fèi)會(huì)員
  • 工商認(rèn)證: 【已認(rèn)證】
  • 最后認(rèn)證時(shí)間:2013年
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  • 企業(yè)類型:生產(chǎn)商
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ELISA試劑盒兩大步驟

點(diǎn)擊次數(shù):133 發(fā)布時(shí)間:2017/6/12

試驗(yàn)有效性判斷;陰性對(duì)照:正常情況下,陰性對(duì)照孔OD450值≤0.2;陽(yáng)性對(duì)照:正常情況下,陽(yáng)性對(duì)照孔OD450值≥0.4;臨界值(C.O.)核算:臨界值=0.2+陰性對(duì)照均值;陰性對(duì)照OD450值大于0.2時(shí)應(yīng)放棄,如所有陰性對(duì)照OD450值均大于0.2時(shí)須重復(fù)試驗(yàn);陰性對(duì)照低于0.05時(shí)以0.05核算。

 

elisa試劑盒操作過(guò)程

病毒性腸炎(DVE),又名瘟(DP)是由病毒性腸炎病毒(DEV)致使的、鵝及多種雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病。傳達(dá)迅速,發(fā)病率和死亡率都很高,給中國(guó)養(yǎng)禽業(yè)形成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在病毒性腸炎的免疫預(yù)防工作中,接種了病毒性腸炎疫苗后,因?yàn)槎喾N要素也許致使免疫不發(fā)生或發(fā)生低水平病毒性腸炎病毒抗體。

B蛋白是病毒的囊膜蛋白,具有吸附、穿入、交融細(xì)胞以及細(xì)胞間傳達(dá)功用,具有杰出的反響原性及免疫原性,誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生高水平的體液和細(xì)胞免疫反響。本試劑盒選用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢查血清中抗病毒性腸炎病毒gB蛋白抗體IgG。用于免疫病毒性腸炎疫苗后的抗體動(dòng)態(tài)水平監(jiān)測(cè),輔導(dǎo)免疫預(yù)防工作,評(píng)價(jià)病毒性腸炎免疫情況,也可用于該病的流行病學(xué)查詢。

 

ELISA試劑盒試驗(yàn)過(guò)程

需求自備的器件;微量移液器,微量移液器配套運(yùn)用的槍頭,用來(lái)稀釋洗滌液的500ml量筒,適用于檢查96T微孔板的酶標(biāo)儀,用于稀釋樣品的1.5ml Ep管,蒸餾水或去離子水。 樣品的制備;用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行100倍稀釋(建議:2μl血清樣品參加198μl樣品稀釋液中),樣品參加包被板前要充沛混勻,稀釋不一樣待檢樣品留意更換槍頭。留意:①制備血清用的血液樣本應(yīng)無(wú)溶血景象發(fā)生;②不能稀釋陰性、陽(yáng)性對(duì)照。

操作過(guò)程;在A1和A2孔平分別參加100μl陰性對(duì)照;在A3和A4孔平分別參加100μl陽(yáng)性對(duì)照;取100μl經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品參加相應(yīng)孔中,并做好記載;37℃孵育1h;將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可運(yùn)用。如有結(jié)晶,需先溶解后,方可進(jìn)行稀釋)進(jìn)行洗板,重復(fù)5次,每次30s;加液時(shí)避免各孔間洗滌液串流影響檢查成果,盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩潔凈;每孔加100μl酶標(biāo)聯(lián)系物;37℃孵育1h;重復(fù)過(guò)程3.5;每孔加100μl底物液;37℃孵育10min(避光顯色);每孔加100μl的終止液;立刻于450nm波利益測(cè)定各孔的吸光度值,即OD450值。

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