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ELISA試劑盒實驗標本易出現的問題
點擊次數：115 發(fā)布時間：2017/2/7
ELISA試劑盒標本受細菌污染
因菌體中也許富含內源性辣根過氧化物酶，因而，被細菌污染的標本同溶血標本相同，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。
標本保留不當
在冰箱中保留過久的標本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構成二聚體，在間接法ELISA測定中會致使本底過深、乃至構成假陽性；標本放置時刻過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性削弱，亦可出現假陰性。
為戰(zhàn)勝上述攪擾，ELISA測定的血清標本宜為新鮮收集；如不能當即測定，5天內測定的血清標本可存放于4℃，ELISA試劑盒1周后測定的血清標本應低溫凍存。
凍存后融解的標本，蛋白質有些濃縮，散布不均，應充沛混合后再測定，但混勻時應輕柔，不行激烈振動。
標本溶血
ELISA試劑盒標本凝集不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液收集后1/2~2h開端凝結，18~24h徹底凝結。臨床查驗工作中，有時為了爭取時刻迅速檢測，常在血液還未開端凝結時即強行離心別離血清，此刻的血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測定過程中能夠構成肉眼可見的纖維蛋白塊，易構成假陽性成果；這類狀況于次日復查時因血凝已徹底，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復查成果變?yōu)殛幮浴?/div>
因為各種人為原因致使的標本溶血，均可因紅細胞損壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA測定中，會致使非特異性顯色，攪擾測定成果。
ELISA試劑盒為戰(zhàn)勝上述攪擾效果，標本收集時有必要留意防止溶血。
為防止上述攪擾效果，處理的辦法*佳是血液標本收集后有必要使其充沛凝結后再別離血清，或標本收集時用帶別離膠的采血管或于采血管中參加恰當的促凝劑。
ELISA試劑盒標本管中增加物質的影響
抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過氧化物酶活性）及迅速別離血清的別離膠等均對ELISA測定有一定攪擾效果。
