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技術(shù)文章
淺在ELISA試劑盒的保溫工作
點(diǎn)擊次數(shù):154 發(fā)布時(shí)間:2017/7/4 9:43:54
在elisa試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加試劑盒系物后?乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時(shí)刻,這一保溫進(jìn)程稱(chēng)為溫育,有人稱(chēng)之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的聯(lián)系只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié) 合的時(shí)機(jī),只需*靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個(gè)逐漸平衡的進(jìn)程,因而需經(jīng)擴(kuò)散才干到達(dá)反響的結(jié)尾。在這以后參加的酶符號(hào)抗體與固相抗 原的聯(lián)系也相同如此。這即是為什么ELISA反響老是需求必定時(shí)刻的溫育。溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體聯(lián)系的合適溫度。在樹(shù)立ELISA辦法作反響 動(dòng)力學(xué)研討時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1~2小時(shí),產(chǎn)品的生成可達(dá)頂峰。為加快反響,可進(jìn)步反響的溫度,有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜 選用更高的溫度?乖贵w反響4℃更為徹底,在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中,以構(gòu)成*多的沉積。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng),在ELISA試劑盒中通常不予 選用。
保溫的辦法除有的 ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,通常均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度敏捷平 衡。為避免蒸騰,板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳 熱性良好的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,*后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。 無(wú)論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)厲約束在規(guī)則的范圍內(nèi),規(guī)范室溫溫度是指 20~25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的請(qǐng)求操控溫育。室溫溫育時(shí),ELISA試劑盒只需平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)留意溫育的溫度和時(shí)刻應(yīng)按規(guī)則力求準(zhǔn) 確。為確保這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。
ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)平臺(tái),成熟的抗原、抗體研制體系,熟練掌握各種酶聯(lián)技能,如雙抗夾心法、(直接)競(jìng)爭(zhēng)法、間接競(jìng)爭(zhēng)法、阻斷法、間接法、雙抗原夾心法等辦法,聯(lián)系我公司的確診試劑開(kāi)發(fā)團(tuán)隊(duì)咱們可以有用的將試劑盒開(kāi)發(fā)為臨床確診級(jí)別,質(zhì)量處于世界前列。
原創(chuàng)作者:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司