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ELISA試劑盒標準曲線的取點方法

點擊次數(shù):337 發(fā)布時間:2017/2/7 9:59:54
ELISA試劑盒求出樣本含量后需要乘上稀釋倍數(shù)2。
標準曲線只取標準曲線的下面4~5個點,即125,62.5,31.25,15.625,7.8,0,或62.5,31.25,15.625,7.8、3.9、0。
除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外,其它一些細胞因子都要做1:2稀釋(這在咱們的說明書中有提示)。
做法是:先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液(試劑盒中已備),再加50ul樣本。
實驗假如按上訴方法處理后查看仍有負值,則處理數(shù)據(jù)時能夠選用2個方法:這即是在咱們的說明書中主張查看血清時做1:2稀釋的要素。
ELISA試劑盒核算時是相對含量的比照,所以不會影響實驗核算效果。
血清中有些細胞因子的檢出率很低,血清中又富含很多大分子雜蛋白,在血清濃度較高時簡略隱秘抗原的表位,因此在測血清原液經(jīng)常出現(xiàn)負值。
原則是把“0”OD值降到比的樣本OD略低一點,盡可能使樣本的含量滿是正值,一起確保改動“0”OD值后的標準曲線的相關(guān)系數(shù)(r)>0.98。
原則是把樣本的OD值全包括,標準曲線又能至少有4個點。
也即是把標準曲線的下端(即樣本含量會合的這一段)拓寬,求出的數(shù)據(jù)更牢靠。
這么改動后,通常樣本都能得到數(shù)據(jù),低的樣本出來了,高的樣本含量也會高一些。
ELISA試劑盒人為的把“0”pg/ml點OD值降低。

原創(chuàng)作者:上海紀寧實業(yè)有限公司

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