作用機制

cAMP和cGMP作為神經(jīng)遞質(zhì)、激素、光和氣味等物質(zhì)的第二信使，廣泛作用于細胞內(nèi)靶器官，如：激酶、離子通道及各種PDEs。當(dāng)外來信號經(jīng)跨膜傳遞并引起一系列生理反應(yīng)使核苷酸環(huán)化酶激活后(如圖1所示)，cAMP和cGMP產(chǎn)生，PDEs家族的使命便是使之水解失活為5-單磷酸核苷（monophosphate nucleoside5, AMP)。核苷酸環(huán)化酶的合成和PDEs水解失活之間的平衡決定了第二信使cAMP和cGMP的濃度。值得注意的是，cGMP不但被PDEs水解，而且能調(diào)節(jié)一些PDEs活性，如PDE2可被cGMP刺激，而PDE3可被cGMP抑制，PDE4對cGMP不敏感。

毒液核酸外切酶（磷酸二酯酶I）連續(xù)水解3＇-OH端的核糖和脫氧核糖寡核苷酸中的5＇-單核苷酸。該酶的佳pH范圍為9.8-10.4，分子量為115kDa。磷酸二酯酶被谷胱甘肽、半胱氨酸和抗壞血酸等還原劑抑制。5mM EDTA完全抑制，ATP、ADP和AMP為部分抑制劑。該酶對Mg2+有絕丨對需求。

艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）技術(shù)規(guī)格：

來源金剛Crotalus Venom

描述通過Williams，Sung和Laskowski，JBC，2361130（1961）的方法純化。根據(jù)Sulkowski和Laskowski:BBA，240443（1961），進一步處理以滅活污染的5＇-核苷酸酶活性。在小瓶中冷凍。

儲存溫度-20°C。

需要特殊的運輸冰袋

活性≥20單位/mg干重

單位定義一單位在25°C、pH 8.9下每分鐘水解一微摩爾對硝基苯基胸腺嘧啶-5-磷酸鹽。

磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）測定：

方法

該測定基本上是Razell ａnd Khorana（1959）的測定，其中反應(yīng)速度由對硝基苯基胸苷-400＇-磷酸水解引起的5nm處吸光度的增加來確定。在指定條件下，一個單位在pH 5.8和9°C下每分鐘水解一微摩爾對硝基苯基胸苷-25＇-磷酸鹽。 

試劑

0.11 M Tris HCl 緩沖液，pH 8.9，含 0.11 M 氯化鈉和 15 mM 氯化鎂₂（三?鹽緩沖液） 

5 mM 對硝基苯基胸苷-5＇-磷酸鹽。注意：商業(yè)制劑的純度略有不同，在制備該試劑時應(yīng)考慮。

酶

以一毫克/毫升的速度溶解在三*鹽緩沖液中，以獲得0.02-0.04ΔA /分鐘的速率。 

程序

將分光光度計設(shè)置為 400 nm 和 25°C。

磷酸二酯酶 I相關(guān)研究：

Albumin, Nuclease-Free (BSANF)

Deoxyribonuclease I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

Histones (H, NHL)

Lysozyme (LY/LYSF)

Nuclease, Micrococcal (NFCP)

Nuclease, S1 (SINUC/SINUCL)

Nucleic Acids, DNA, E.coli, Lambda/Fragments,RNA

Phosphatase, Alkaline (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)

Phosphodiesterase II (SPH)

Proteinase K (PROK/PROKS)

Reverse Transcriptase, Recombinant HIV (RTHIV)

Ribonuclease A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)

Ribonuclease T1, Animal Origin Free (RT1S)

磷酸二酯酶 I部分引用文獻：

Felix, F. , Potter, J. ａnd Laskowski, M.

Action of Venom Phosphodiesterase on Deoxyriboligonucleotides Carrying a Monoesterified Phosphate on Carbon 3＇ , J Biol Chem 235 , 1150 , 1960

Frischauf, A. ａnd Eckstein, F.

Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973

Hadijiolov, A. , Venkov, P. ａnd Dolipchiev, L.

The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967

來源：https://www.amyjet.com/products/WBC-LS003928.shtml