圖源：網(wǎng)絡(luò)

Annexin V是一種分子量為358kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,廣泛分布于真核細(xì)胞胞漿內(nèi),參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Annexin V能與磷酯酰絲氨酸( phosphatidylserine簡(jiǎn)稱PS)高親和力、特異地結(jié)合。在正常細(xì)胞要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,細(xì)胞膜上的PS會(huì)外翻到細(xì)胞表面。用帶有綠色熒光的 Annexinv-fitc標(biāo)識(shí)出凋亡細(xì)胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒還提供了碘化丙啶（PI），PI可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光,用 Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后,正常的活細(xì)胞不被Annexin V-FITC和PI染色;凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-FITC染色,PI染色呈陰性;壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時(shí)被 Annexin V-FTC和PI雙重染色,以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞。

艾美捷Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：

1.該試劑盒只能檢測(cè)活細(xì)胞,而不能用于切片、擦刮、固定或浸潤(rùn)細(xì)胞樣品的檢測(cè)。

2.細(xì)胞凋亡是一種持續(xù)變化的動(dòng)態(tài)過(guò)程,選擇合適的誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)觀察凋亡比較重要。染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加

3.如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。

4.PBS洗滌細(xì)胞,洗掉殘留的胰酶,否則殘留的胰酶會(huì)消化并降解 Annexin V-FTC,終導(dǎo)致染色失敗。

5.熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存

6.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

7檢測(cè)血液樣品時(shí),如果含有血小板,請(qǐng)使用含有EDTA的緩沖劑并200xg離心洗去血小板。因?yàn)檠“?/span>含有PS,能與Annexin V結(jié)合，從而干擾試驗(yàn)結(jié)果。

8.旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落

9. Annexinv-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒保存條件：

4℃保存, Annexin V-FTC、P|染色液需避光保存,半年有效。若長(zhǎng)期保存,可以把P染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存, Annexin V-FITC結(jié)合液可以直接-20℃保存

來(lái)源：艾美捷科技