6-His-Tag由于其與附著于瓊脂糖凝膠的鎳或鈷金屬離子結(jié)合的親和力而被廣泛使用，

其然后可用于純化天然或變性狀態(tài)的蛋白質(zhì)。

多組氨酸標(biāo)簽的使用已成為蛋白質(zhì)純化的一種流行方法，通常在篩選過程中用作您感興趣的蛋白質(zhì)或肽的標(biāo)簽。這種多組氨酸表位標(biāo)簽通常由位于N端、C端或內(nèi)部的六個(gè)連續(xù)組氨酸氨基酸殘基組成。6-His-Tag由于其與附著在瓊脂糖凝膠上的鎳或鈷金屬離子結(jié)合的親和力而被廣泛使用，隨后可用于純化天然或變性狀態(tài)的蛋白質(zhì)。

Advanced Targeting Systems艾美捷抗-6-His-SAP是小鼠抗6His單克隆抗體和核糖體失活蛋白saporin的化學(xué)偶聯(lián)物。它特別消除了細(xì)胞外表達(dá)6 His標(biāo)記蛋白的細(xì)胞和識別YOUR 6 His標(biāo)簽重組蛋白的細(xì)胞。

Advanced Targeting Systems艾美捷抗-6-His-SAP特異性和制備：

這種標(biāo)記靶向毒素識別細(xì)胞中過度表達(dá)的YOUR 6 His標(biāo)記重組蛋白或6 His標(biāo)簽蛋白�？�-6-His-SAP是小鼠抗6His單克隆抗體的化學(xué)偶聯(lián)物核糖體失活蛋白，saporin。

Advanced Targeting Systems/ATSbio艾美捷抗-6-His-SAP使用和儲存：

抗6 His SAP特異性地消除具有6 His標(biāo)記蛋白和細(xì)胞胞外表達(dá)的細(xì)胞識別YOUR 6 His標(biāo)記的重組蛋白。材料可能有很多不同；工作稀釋度必須由終用戶確定。如果這是一個(gè)新的批次，您必須評估在開始完整的實(shí)驗(yàn)方案之進(jìn)行工作稀釋。使用輕輕旋轉(zhuǎn)材料；5-10的縮微膠片就足夠了。將材料儲存在未稀釋的等分試樣在-20°C下保存1-2個(gè)月。為了長期儲存，將材料儲存在–80°C。布料應(yīng)等分至方便的體積和數(shù)量，以避免重復(fù)冷凍和解凍損害蛋白質(zhì)含量。在這些條件下，該材料具有非常穩(wěn)定的保質(zhì)期。解凍應(yīng)該是在室溫或冰上進(jìn)行。解凍的溶液在使用應(yīng)保持在冰上。

請勿將還原劑（如二硫蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸）用于此材料。它將使毒素失活。這種物質(zhì)是一種強(qiáng)的細(xì)胞毒素。應(yīng)由經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行搬運(yùn)。手套和處理本產(chǎn)品時(shí)需要佩戴安全眼鏡。處置時(shí)必須小心；高壓滅菌或暴露至0.2M氫氧化鈉將使材料失活。所有與此材料接觸的實(shí)驗(yàn)室用品應(yīng)同樣處理。

注：當(dāng)用于細(xì)胞毒性試驗(yàn)時(shí)，未結(jié)合的一抗體將與一抗體競爭與抗-6His-ZAP結(jié)合，并可通過競爭性抑制初抗體-次綴合物復(fù)合物來降低細(xì)胞毒性。

圖：KNRK細(xì)胞以2500個(gè)細(xì)胞/90μl/孔接種在37°C下孵育過夜。第二天，Saporin和rIB4-在細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行SAP稀釋，并加入10μl每個(gè)井。rIB4-6His在細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋終濃度為100 ng/10μl Anti-6 HisZAP，向每個(gè)孔中加入10μl。盤子在37°C下孵育72小時(shí)。為了發(fā)展，培養(yǎng)基是從平板上取下，用10%固定細(xì)胞TCA在4°C下持續(xù)1小時(shí)。用自來水并風(fēng)干。50μl 0.4%向每個(gè)孔中加入磺胺若丹明B/1%乙酸并在室溫下孵育板30分鐘。這個(gè)用1%乙酸洗滌板3次以風(fēng)干。用100μl 10mM溶解染料每孔無緩沖tris基底，輕輕搖動(dòng)5分鐘。在564nm下讀取板，并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析使用Prism軟件（GraphPad，圣地亞哥）

Advanced Targeting Systems ZAP試劑盒和二標(biāo)記方案：

ZAP抗體內(nèi)化試劑盒文獻(xiàn)

生物素-Z（鏈霉親和素ZAP）文獻(xiàn)

ZAP抗體內(nèi)化試劑盒和生物素-Z（Streptavidin ZAP）視頻教程

評估潛在靶向分子。（Kohls M，自然方法，2006）

Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究域包含神經(jīng)靶向毒素，神經(jīng)生物學(xué)研究方面的抗體/蛋白，靶向劑內(nèi)化水平檢測工具等。艾美捷科技是ATSbio的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml