HQ銀是一種獨特的銀增強試劑。它含有一種增稠劑，是一種天然的聚合膠：它被用來調(diào)節(jié)混合物與金納米粒子的反應速度。這使該試劑具有一些優(yōu)勢，與其他銀增強劑相比，性能得到了提高，如下圖所示。

圖：使用Nanogold®和HQ Silver預包埋免疫電子顯微鏡。Nanogold Fab山羊抗兔IgG二抗體標記大鼠腦中K+通道Kv2.1亞單位，隨后HQ銀增強。注意免疫染色的高密度和特異性，甚至可以闡明細胞膜細胞質(zhì)側(cè)和高爾基體外堆的亞單位定位；軸突和終末明顯為陰性。J.Du，J.-H.的工作。Tao Cheng，P.Zerfas和C.J.McBain，NIH。見《神經(jīng)科學》，8437-48（1998）。棒=1微米

這些特點使HQ銀成為電子顯微鏡的理想選擇，但由于天然增稠劑的存在，其成分比其他一些銀增強試劑更容易受到微生物的污染，而且其粘稠的性質(zhì)意味著你在使用這種試劑時可能需要更小心。在使用HQ銀時，使用這些提示和技巧，將獲得J佳效果。

HQ銀必須儲存在不允許微生物污染和生長的條件下。如果你打算幾天內(nèi)不使用該試劑，應將組分冷凍保存，好是在-20℃。

反復的凍融循環(huán)會使增稠劑的性能下降。因此，第1次使用HQ Silver時，如果將每種成分分成若干等份，每份足以滿足典型實驗運行，然后將未使用的等份單獨冷凍，將在試劑的使用壽命內(nèi)獲得J佳結(jié)果。然后，每次進行需要HQ Silver的實驗或一系列的實驗時，解凍并混合一組等分樣品。

因為這些成分包括不同數(shù)量的增稠劑，它們具有不同的粘度，如果它們被快速分配，分配出相等的數(shù)量可能是一個挑戰(zhàn)。使用可調(diào)節(jié)的移液器來吸取和分配所需的量，每種成分使用不同的吸頭，可以獲得J佳效果；慢慢地吸取將有助于避免氣泡的產(chǎn)生。正排量移液器是J好的。緩慢的手動吸液實際上比自動吸液更好，因為它能使粘稠的溶液得到更準確的分裝。B組份（"調(diào)節(jié)劑"）實際上不包含銀沉積所需的任何成分：因此，如果先分配B組份，然后再分配A和C組份，將確�；旌虾吞砑拥皆嚇又械难舆t時間J短。

Nanoprobes艾美捷所用的溶劑和緩沖液在使用都經(jīng)過脫氣處理，以消除溶解氧和形成氣泡的風險。如果有必要攪拌溶液，請使用設(shè)置較低的渦旋器，而不是用手攪拌；如果長時間輕輕攪拌（如用印跡或玻片），請使用設(shè)置較低的旋轉(zhuǎn)搖床 - 這些將比手動攪拌引入更少的氣泡。

對于光鏡和印跡的應用，如果超微結(jié)構(gòu)的保存和均勻的顆粒大小不是問題，應該考慮使用LI銀代替。這種試劑的顯影速度更慢，而且由于它是無色和非粘性的，可以通過光鏡或其他光學檢測方法更容易監(jiān)測顯影。另外，在某些應用中，金增強可能會有更好的結(jié)果。

Nanoprobes 艾美捷：控制化學計量。納戈爾德®與生物分子的比例

Nanoprobes Monomaleimido Nanogold、Mono-Sulfo-NHS-Nanogold和Monoamino Nanogold試劑都被配制成每個金粒子含有接近一個反應性功能；這是通過Monoamino Nanogold（其他兩種試劑的起始材料）在陰離子離子交換柱上的分離而實現(xiàn)的，它可以分離出具有不同數(shù)量氨基的金粒子，在我們的標記實驗中，這些試劑以單功能的方式表現(xiàn)。因此，每個納諾金顆粒將只與一種生物分子反應。

當用納戈爾德標記時，你通常應該選擇標記一個特色的官能團的反應，即在生物大分子中只出現(xiàn)一次的官能團，如半胱氨酸，而不是在幾個不同部位出現(xiàn)的官能團。

尺寸對分離很重要。納米金的分子量接近15,000，但它的行為可能類似于較小的蛋白質(zhì)，因為它的大部分質(zhì)量來自重金原子。當你標記一個較大的生物分子（如抗體或蛋白質(zhì)）時，我們建議使用少量過量的納戈爾德，因為從色譜上看，從共軛產(chǎn)物中分離過量的小金子通常比分離未標記的蛋白質(zhì)要容易。然而，由于每個生物分子通常只使用1.5到3個納諾金，而且反應產(chǎn)率通常低于100%，這對每個蛋白質(zhì)的納諾金標簽數(shù)量提出了一個相對較低的上限。

當標記與納戈爾德大小相似或更小的分子時，你將使用接近1 : 1的納戈爾德：生物分子的比例，或者對于較小的分子，使用過量的小分子。由于納戈爾德是單功能的，這就限制了大多數(shù)的標記，即使生物分子有多個結(jié)合位點，每個生物分子只有一個納戈爾德。

納米金標簽相當大：包括其配位配體，它的整體分子直徑約為2.6納米。一旦附著，它就會阻礙其他納戈爾德試劑接近附近的位置。這也有利于納諾金與共軛生物分子接近1 : 1的比例。

納米金不帶電，但它是可溶的－－它以提供可溶性的方式被功能化，因此它被溶解，而不是僅僅被懸浮。因此，盡管納米金顆粒之間在溶液中沒有正式的排斥力（與膠體金不同），但納米金顆粒表面對水溶液的親和力確保它們保持溶解和分離。

這一規(guī)則的一個例外是NTA-Ni(II)-Nanogold，它具有多個硝酸三乙酸-鎳（II）功能，以便通過多個NTA-Ni(II)獲得的螯合效應增加與多組氨酸標簽的結(jié)合。他的結(jié)合。在這種情況下，對化學計量的控制通常是通過使用比His標簽的生物分子過量的納戈爾德來實現(xiàn)的：對于帶有獨特His標簽的生物分子，過量的納戈爾德有利于形成1：1的共軛物，這是因為His標簽的生物分子遇到未結(jié)合的納戈爾德的概率更高，也因為結(jié)合的納戈爾德被結(jié)合的分子立體地阻礙了。如果你想使用帶正電的納戈爾德或帶負電的納戈爾德進行標記或共軛，也有類似的考慮。

Nanoprobes特色熒光納米金探針在一個探針中結(jié)合了納米金（Nanogold）和熒光素，用于熒光和電鏡兩種技術(shù)共同進行樣品成像。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。

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