Jackson公司選擇抗的注意事項：

市面上有多種不同形式、克隆性和特異性的抗，這些是選擇合適試劑時需要考慮的重要因素。

1.特異性——免疫原

用于產生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質量差的免疫原產生的抗體將導致不可靠且可能無法重現的結果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質的類似3結構。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產生的抗體可用作蛋白質印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質

如果將純化的蛋白質用作免疫原，則針對它們產生的抗體可能無法識別蛋白質印跡中變性蛋白質的線性表位。些使用天然蛋白質產生的抗體只能識別蛋白質表面的天然氧化構象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

抗的宿主種類

理想情況下，抗應在與待分析樣品不同的物種中產生。這是為了避免二抗檢測樣品中的免疫球蛋白（如果存在）。例如，來自小鼠的樣本可能含有小鼠免疫球蛋白。如果抗也在小鼠體內制備，則抗小鼠二抗不僅可以檢測與目標蛋白結合的抗，還可以檢測小鼠樣品中免疫球蛋白重鏈和輕鏈的結合。當目標蛋白質的分子量與重鏈 (50 kDa) 或輕鏈 (25 kDa) 相似時，這可能會特別成問題，因為目標蛋白質和內源性小鼠 IgG 之間的區(qū)分變得不可能.

Jackson公司單克隆和多克隆抗

單克隆抗體和多克隆抗體均可用于蛋白質印跡。單克隆抗體由單個 B 細胞克隆產生，并產生對個表位特異的抗體。而多克隆抗體是由不同的 B 細胞譜系產生的，因此包含識別抗原上不同表位的多個克隆。這兩種類型都有優(yōu)點和局限性（如下表所示）。

Jackson公司抗體驗證的注意事項：

每個抗必須按預期執(zhí)行，在實驗條件下檢測感興趣的蛋白質。理想情況下，將為每個新的實驗設置驗證每個抗和蛋白質對的實驗適用性。在驗證過程中應解決抗性能的四個方面。這些是：

1.對感興趣的抗原/蛋白質的特異性

2.在實驗條件下對抗原的特異性（天然或變性）

3.對抗原的親和力

4.再現性

Jackson公司注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務域覆蓋各大學科研所和醫(yī)院里的動物研究以及生物醫(yī)學研究機構的科學家。艾美捷科技是Jackson公司的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml