圖 1： Palmitoyl NANOGOLD® 的結(jié)構(gòu)（未按比例顯示）。

Palmitoyl NANOGOLD® 以固體形式提供，從甲醇溶液中干燥。收到后應(yīng)冷藏，并儲存在-20°C。

艾美捷 Nanoprobes Palmitoyl NANOGOLD® 具有疏水性，可以插入膠束等系統(tǒng)中的有機相中。1它可溶于甲醇以及甲醇-三氯甲烷和甲醇-二氯甲烷混合物中。下面給出了甲醇溶液在特定波長下的消光系數(shù)：

波長 (nm) 消光系數(shù)*

280 2.25 X 10 5

420 1.12×10 5

* 測量 5 X 10 -6 M 甲醇溶液。

重金標記的脂質(zhì)體可以通過將 Palmitoyl-Nanogold® 溶解在lv仿中，與水混合，蒸發(fā)lv仿，然后使用超聲處理或其他常用制備方法形成囊泡來形成。1 Palmitoyl-Nanogold® 也可以用未標記的脂質(zhì)稀釋并用于制備標記較少的脂質(zhì)體。將 0.1 至 1% Palmitoyl-Nanogold® 與未標記的脂質(zhì)摻入通常適用于制備 Nanogold® 標記的脂質(zhì)體，其性質(zhì)和形態(tài)與沒有金標記的脂質(zhì)體相同。旦摻入膠束或其他結(jié)構(gòu)中，就可以使用按照與未標記棕櫚酸相同的方式進行個別實驗所需的程序。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold® 試劑染色的般注意事項：

基本上，正常的方法學(xué)可以成功地與 NANOGOLD® 免疫試劑起使用�？贵w和金的濃度與膠體金抗體的其他商業(yè)制劑相似。因此，類似的稀釋劑和封閉劑是合適的。

主要區(qū)別在于結(jié)果：

NANOGOLD® 是種J其均勻的 1.4 nm 直徑金顆粒（約 10%）。

NANOGOLD® 偶聯(lián)物不含聚集體。這與通常通過離心制備以去除大聚集體并經(jīng)常包含較小聚集體的其他膠體金結(jié)合物形成鮮明對比。

接近 1 NANOGOLD® 顆粒對 1 個探針分子使該產(chǎn)品與其他膠體金抗體制劑的 0.2 - 10 可變化學(xué)計量不同。

NANOGOLD® 顆粒不像其他膠體金那樣對蛋白質(zhì)具有親和力。這減少了背景和錯誤標記。

與大多數(shù)其他膠體金相比，NANOGOLD® 與銀的顯影效果更好，因此具有更高的靈敏度。銀增強可用于使免疫標記可用于光學(xué)顯微鏡和免疫印跡，并改善結(jié)果。

使用 艾美捷 Nanoprobes Nanogold® 染色劑建議：

由于 1.4 nm NANOGOLD® 顆粒非常小，用 OsO 4、醋酸雙氧鈾或檸檬酸鉛過度染色可能會掩蓋單個 NANOGOLD® 顆粒的直接可視性。提高 NANOGOLD® 可見性的三項建議是：

使用減少量或濃度的常用污漬。

使用較低原子序數(shù)的染色劑，例如NANOVAN，種釩基染色劑。3

使用銀顯影劑（例如 LI SILVER 或 HQ SILVER）增強 NANOGOLD®。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold® 用于光學(xué)顯微鏡的染色和銀增強：

用 NANOGOLD® 標記的特征在銀增強后在光學(xué)顯微鏡下會被染成黑色。應(yīng)嘗試不同的開發(fā)時間來確定哪個適合您的實驗。免疫標記程序與 EM 相似；下面給出了個合適的程序。

在銀增強之，樣品必須用去離子水沖洗。這是因為該試劑溶液中含有銀離子，銀離子與氯化物、磷酸鹽和其他作為緩沖溶液成分的陰離子反應(yīng)形成沉淀。下面給出了用 NANOGOLD® 和銀增強進行免疫標記的程序。

1.用去離子水沖洗（3 X 1 分鐘）。

2.可選（可能會降低背景）：用 0.02 M 檸檬酸鈉緩沖液，pH 7.0（3 X 5 分鐘）沖洗。

3.用新鮮混合的顯影液將樣品顯影 5-20 分鐘，或按照銀試劑的說明進行�；蚨嗷蛏俚臅r間可用于控制信號強度。可以使用系列不同的開發(fā)時間，為您的實驗找到佳增強；通常較短的抗體孵育時間將需要較長的銀顯影時間。

4.用去離子水沖洗（2 X 5 分鐘）。

5.如果需要，現(xiàn)在可以在檢查使用常用試劑對樣本進行染色。

為了獲得特別暗的銀信號，可以用新鮮混合的顯影劑部分重復(fù)銀增強。

Nanoprobes注于免疫金標記和免疫測定試驗域，為廣大科研機構(gòu)提供用于檢測生物分子的靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Nanoprobes.shtml