1.對(duì)于非灌注，用無菌剪刀或手術(shù)刀將分離的組織切碎或切成 2-4 毫米的塊。

2.將組織塊加入適當(dāng)?shù)木彌_液或冰上的平衡鹽溶液中，洗滌 2-3 次。

3.加入適量的酶并在佳溫度（通常為 37°C）下孵育適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，間歇混合。

4.通過移液（研磨）輕輕分散細(xì)胞。

5.通過細(xì)網(wǎng)過濾細(xì)胞懸浮液。

6.讓細(xì)胞沉淀并倒出含有酶的多余液體。洗滌并重復(fù)2-3次。

7.在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或緩沖液中重懸細(xì)胞。

8.定量細(xì)胞產(chǎn)量和活力。

9.如果需要，用于培養(yǎng)的種子細(xì)胞。

灌注程序需要特殊的設(shè)備和技術(shù)來循環(huán)緩沖液、培養(yǎng)基和酶。請(qǐng)參閱參考文本以獲取更多信息和指導(dǎo)。

艾美捷Worthington方法和材料：研磨：（通過溫和的泵送作用分散細(xì)胞）

這可能是個(gè)至關(guān)重要的過程。它用于在解離混合物中孵育后分解組織碎片。如果做得太猛烈，細(xì)胞會(huì)被破壞，降低活力；太弱，組織碎片將保持完整，從而降低產(chǎn)量。使用 10 ml 移液器輕輕研磨，以每約 3.0 ml 的速度填充和排空桶。您可以通過反復(fù)試驗(yàn)確定適合您的組織的速率。避免使細(xì)胞懸液起泡。

注：Worthington 的組織解離酶可互換用于所引用的大多數(shù)制劑。

Worthington核心酶：包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml