產(chǎn)品展示
尿酸酶丨Worthington豬肝尿酸酶的特征:
點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/7/28 15:00:43
更新日期:2022/7/28 15:00:43
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
尿酸酶(尿酸氧化酶)催化以下整體反應(yīng):
Urate+O2+H2O→Allantoin+H2O2+CO2
該反應(yīng)代表除人類、高等猿和達爾馬提亞犬之外的所有哺乳動物中嘌呤分解代謝的終止。
Mahler (1963) 對這種酶進行了綜述。
尿酸酶對于生物體液中尿酸的測定非常重要。反應(yīng)不僅具有特異性,還可以在 292 nm、340 nm 或通過耦合顯色響應(yīng)進行比色監(jiān)測。非酶促方法會受到混濁或存在阿司匹林、抗壞血酸、谷胱甘肽、撲熱息痛和許多抗生素的干擾。參見 Itiaba等人。(1975);關(guān)等人。(1975);佩斯等人。(1974);Gökicke 和 Gökicke (1973);卡巴薩卡連等人。(1973);拉姆和甘比諾 (1973);斯蒂爾 (1970) 和特洛伊和珀迪 (1970)。
艾美捷Worthington 豬肝尿酸酶的特征:
分子量:125,000 (Pitts et al . 1974)。
組成:該酶由 32,000 MW 的四個亞基組成,每個分子 (125,000 MW) 有個銅原子 (Pitts et al . 1974)。
佳 pH 值:9.0 (Mahler 1963)。
消光系數(shù):= 11.3 消光系數(shù)(Mahler 1963)。
等電點:6.3 (Mahler 1963)。
抑制劑:尿酸鹽的各種嘌呤類似物(Bergmann等人1963;Baum等人1956)和其他銅螯合劑。Fridovich (1965) 報告說,堿性溶液中的尿酸鹽可以轉(zhuǎn)化為有效的抑制劑,氧酸鹽。
特異性:該酶對尿酸具有高度特異性。(見馬勒 1963 年)。
穩(wěn)定性:在 10% 飽和硫酸銨中純化的尿酸酶在 5°C 下可穩(wěn)定年。
艾美捷Worthington尿酸酶測定方法:
Method : 反應(yīng)速度是通過測量尿酸氧化成尿囊素導(dǎo)致的 290 nm 處吸光度的降低來確定的。在特定條件下,個單位在 25°C 和 pH 8.5 下每分鐘氧化 1 微摩爾尿酸。
試劑:
1.0.1 M 硼酸鈉緩沖液,pH 8.5
2.0.12 mM 尿酸。將 60 mg 碳酸鋰溶解在 15 ml 水中并過濾。通過將 100 mg 尿酸溶解在濾液中來制備新鮮溶液。可能需要加熱至 50-60°C 以產(chǎn)生溶液。冷卻并用試劑水定容至 100 ml。用 0.1 M 硼酸鹽稀釋 1/100,pH 8.5。
注意:使用,0.1 M 硼酸鈉緩沖液和 0.12 mM 尿酸溶液應(yīng)通過將 O 2鼓泡通過溶液 10-15 分鐘進行氧化。每 20 分鐘再充氧次。
酶:
以 1 mg/ml 溶解于冷 (5°C) 0.1 M 硼酸鈉緩沖液,pH 8.5。
方程:
在即將進行測定之,進步稀釋至 0.01-0.1 單位/ml 的濃度。
程序:
將分光光度計調(diào)整到 290 nm 和 25°C。
移液器如下:
硼酸鹽緩沖液 0.5 毫升
0.12 毫米尿酸 2.0毫升
在分光光度計中孵育 4-5 分鐘以達到溫度平衡并確定空白率(如果有)。在零時間添加 0.5 ml 酶并記錄 A 290的下降6-7 分鐘。從曲線的初始線性部分計算 ΔA 290 。
Worthington核心酶:包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。