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產(chǎn)品展示

Worthington果膠酶的特性及測(cè)定方案

點(diǎn)擊次數(shù):0發(fā)布時(shí)間:2022/7/26 16:53:10

Worthington果膠酶的特性及測(cè)定方案

更新日期:2022/7/26 16:53:10

所 在 地:中國大陸

產(chǎn)品型號(hào):

簡(jiǎn)單介紹:Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。

相關(guān)標(biāo)簽:Worthington 

優(yōu)質(zhì)供應(yīng)

詳細(xì)內(nèi)容

 艾美捷Worthington 純化果膠酶是種多組分制劑,可高效解聚具有不同酯化程度的植物果膠。該產(chǎn)品含有大量的半纖維素酶、纖維素酶、果膠酯酶和木聚糖酶活性,與果膠裂解酶和多聚半乳糖醛酸酶協(xié)同作用消化植物細(xì)胞壁組織。當(dāng)與 Worthington 純化的纖維素酶起使用時(shí),已發(fā)現(xiàn)純化的果膠酶在玉米、大豆、紅甜菜、向日葵、番茄和柑橘等幾種植物系統(tǒng)中非常成功地產(chǎn)生了高產(chǎn)量的活原生質(zhì)體。般來說,濃度范圍為 0.1% 至 0.5% 的果膠酶(伴隨著 0.5% 至 1.5% 的纖維素酶)在 24°至 37°下使用 至 16 小時(shí)會(huì)產(chǎn)生良好的效果。

 

主要的:  

果膠裂解酶 (4.2.2.10)

多聚半乳糖醛酸酶 (3.2.1.15)

半乳聚糖 1,4-α-半乳糖醛酸酶 (3.2.1.67)

 

次要的:

纖維素酶(內(nèi)切纖維素酶(3.2.1.4)、外切纖維素酶( 3.2.1.91) 、纖維二糖酶(3.2.1.21))

半纖維素酶 (3.1.1.73)

果膠酯酶 (3.1.1.11)

木聚糖酶 (3.2.1.8)

 

艾美捷Worthington 黑曲霉果膠酶的特性:

除了其高酶活性外,純化的果膠酶還門用于植物原生質(zhì)體培養(yǎng)研究。使用定量測(cè)量D-半乳糖醛酸從多聚半乳糖醛酸中釋放的方法測(cè)定酶。該方法基于使用鹽酸新銅堿顯色試劑測(cè)定法測(cè)定還原糖。當(dāng)與 Worthington 純化的纖維素酶起使用時(shí),已發(fā)現(xiàn)純化的果膠酶可用于在幾種植物系統(tǒng)(例如玉米、大豆、紅甜菜、向日葵、番茄和柑橘)中產(chǎn)生良好產(chǎn)量的活原生質(zhì)體。般來說,濃度范圍為 0.1% 至 0.5% 的果膠酶(伴隨著 0.5% 至 1.5% 的纖維素酶)在 24°至 37°下使用 至 16 小時(shí)會(huì)產(chǎn)生良好的效果。

 

儲(chǔ)存儲(chǔ)存于 2-8°C。防潮。如果不次使用整個(gè)瓶子,在到達(dá)時(shí)稱重成次性等分試樣,并蓋緊、干燥、冷藏保存。材料非常吸濕,如果暴露在濕氣中會(huì)變得發(fā)粘且難以稱重。

 

穩(wěn)定性/儲(chǔ)存: 防潮。如果不次使用整個(gè)瓶子,在到達(dá)時(shí)稱重成次性等分試樣,并在 2-8°下蓋緊并干燥儲(chǔ)存。材料非常吸濕,如果暴露在濕氣中會(huì)變得發(fā)粘且難以稱重。

 

單位定義:個(gè)單位在 37°CpH 5.0 下每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放 1µmole D-半乳糖醛酸。

 

技術(shù)說明:果膠酶具有J強(qiáng)的吸水性;儲(chǔ)存干燥以防受潮。

 

艾美捷Worthington果膠酶的測(cè)定

方法:在 37°C,pH 5.0 條件下,個(gè)單位每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放 1 umole D-半乳糖醛酸。

 

試劑:

0.1 M 檸檬酸/磷酸鹽緩沖液(測(cè)定緩沖液),pH 5.0

顏色試劑 A:將 40g 無水 Na 2 CO 3溶解 在 600 ml 試劑 H 2 O 中。加入 16 g 甘氨酸并攪拌直至溶解。加入 0.450 gm CuSO 4 5H 2 O,攪拌至溶解。用試劑 H 2 O 加至 升。

顏色試劑 B:將 1.2 g neocuprine - HCl 溶解在 升 H 2 O 試劑中。在 4°下儲(chǔ)存在棕色瓶中。

D-半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品,1mg/ml

0.5% 聚半乳糖醛酸底物:

在熱板上加熱 500 ml 檢測(cè)緩沖液。在加熱和攪拌的同時(shí),緩慢加入 2.5 gm 聚半乳糖醛酸。加熱并攪拌直至溶解。它會(huì)有點(diǎn)粘稠和不透明。不要讓溶液沸騰。如有必要,冷卻并恢復(fù)音量。儲(chǔ)存于 4°C。

 

酶:

每天化妝新鮮。將溶液放在冰上直至使用。在檢測(cè)緩沖液中連續(xù)稀釋至 0.01 mg/ml。

 

程序:

準(zhǔn)備三個(gè)試管,每個(gè)試管含有 1 ml 緩沖液和 6 ml 底物(試劑空白)。準(zhǔn)備三個(gè)試管,每個(gè)試管含有 6 ml 底物和 1 ml 0.1 mg/ml 的酶樣品(測(cè)試)。準(zhǔn)備三個(gè)試管,每個(gè)試管含有 6 ml 緩沖液和 1 ml 濃度為 0.1 mg/ml 的酶樣品(樣品空白)。

 

將試管在 37°水浴中孵育 60 分鐘 ± 分鐘。使用 10 μ至 125 μ的 D-半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品將標(biāo)準(zhǔn)曲線管分裝,式三份。

 

試管孵育 60 分鐘后,立即將支架放入冰水中以停止反應(yīng)。從每管 100 μ中分裝到另組管中(也在冰上)。向每個(gè)反應(yīng)管和標(biāo)準(zhǔn)管中加入 2 ml Color Reagent A 和 2 ml Color Reagent B。倒置充分混合。將機(jī)架放入沸水浴中 13 分鐘 ±分鐘。冷卻試管,然后加入 2ml H 2 O。倒置充分混合。使用次性比色皿讀取 A 450與水空白的吸光度。不要使用流通池;橙色附著在玻璃上。計(jì)算每組式三份的平均吸光度。

 

計(jì)算:

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:

 

計(jì)算變化率。曲線應(yīng)該是線性的,直到 100 ug D-半乳糖醛酸,如果不是,用新鮮試劑重復(fù)曲線。

 

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源:https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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