乳過氧化物酶 (LPO) 是種帶有血紅素輔基的糖蛋白，可以作為兩種同工酶的混合物出現(xiàn)。它的分子量為 77,500 道爾頓。LPO催化碘化物的過氧化氫氧化反應(yīng)如下：

2I - + H 2 O 2 + 2H + → I 2 + 2H 2 O。

碘化物直接與血紅素基團(tuán)反應(yīng)；在加入 H 2 O 2后，絡(luò)合物碘化底物。LPO受肼抑制。檢測(cè)程序已從 Morrison 的程序更新為基于 ABTS ® /H 2 O 2的方法，具有更高的靈敏度和重現(xiàn)性。

單位定義：個(gè)單位在 25°C、pH 6.0 下每分鐘減少 1 微摩爾過氧化氫。注意：此單位定義基于種新的測(cè)定方法。以的方法產(chǎn)生了大約 2.8 倍的結(jié)果。

艾美捷 Worthington 來自牛奶的乳過氧化物酶的特征：

分子量：77,500 (Rombauts et al . 1967)。

組成：LPO 是種糖蛋白，每個(gè)分子具有個(gè)單的血紅素輔基（Hultquist 和 Morrison，1963）。它可能由兩種同工酶組成（Rombauts等人1967；Morrison等人1957；以及 Polis 和 Schmukler，1953）。另見 Morrison 和 Hultquist (1963)。

純度指數(shù)：A 412 /A 280 = 0.93-0.96 Allen 和 Morrison 1963）。

消光系數(shù)：消光系數(shù)= 13.9。

艾美捷 Worthington乳過氧化物酶活性：

LPO 與其他過氧化物酶樣，在 H 2 O 2存在下催化許多酚和芳香胺（連苯三酚、抗壞血酸、愈創(chuàng)木酚等）的氧化。參見 Morrison (1970) 第 657 頁以比較各種過氧化物酶的比活性，還有 Maguire 和 Dunford (1971)。Morrison 和 Bayse (1973) 指出，碘化物直接與血紅素基團(tuán)反應(yīng)，然后在加入 H 2 O 2時(shí)，配合物碘化底物。貝斯等人。(1972) 和 Morrison 和 Bayse (1970) 報(bào)告了碘化動(dòng)力學(xué)。Chung 和 Wood (1970) 報(bào)告了硫氰酸鹽的氧化，Maguire 和 Dunford (1972) 報(bào)告了碘化物的氧化。

抑制劑：LPO 被肼抑制 (Allison et al . 1973)。多爾曼等人。(1968) 報(bào)告了氰丨化物抑制的動(dòng)力學(xué)。

艾美捷Worthington乳過氧化物酶的測(cè)定：

方法：測(cè)定程序是對(duì) Morrison (1970) 描述的程序的輕微修改。反應(yīng)速度通過測(cè)量由三碘化物產(chǎn)生引起的A 350的增加來確定。在指定條件下，在 25°C 和 pH 7.0 條件下，個(gè)單位每分鐘會(huì)形成 1 微摩爾三碘化物。

試劑：

0.033 M 磷酸鈉緩沖液 pH 7.0

磷酸鹽緩沖液中的 0.005 M 碘化鉀

0.090 M 過氧化氫。用試劑水將 0.1 ml 過氧化氫（Merck Superoxol 或等效物）稀釋至 10 ml。

酶：

以1 mg/ml 溶解在磷酸鹽緩沖液中。臨用，在磷酸鹽緩沖液中進(jìn)步稀釋以獲得 0.02-0.04 ΔA/分鐘的速率。

程序：

將分光光度計(jì)設(shè)置為 25°C 和 350 nm。通過用 0.005 M 碘化鉀將 0.15 ml 0.090 M 過氧化氫稀釋至 30 ml 來制備反應(yīng)混合物。在室溫下儲(chǔ)存不超過 30 分鐘。將 3.0 ml 反應(yīng)混合物移入比色皿中，并在 25°C 下孵育 3-4 分鐘以達(dá)到溫度平衡并建立空白率（如果有）。加入 0.01 ml 稀釋酶并記錄 A 350中 3-4 分鐘的增加。從曲線的初始線性部分計(jì)算 ΔA 350 /分鐘。反應(yīng)保持線性不超過 1-2 分鐘。

計(jì)算：

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml