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產(chǎn)品展示

艾美捷Worthington脫氧核糖核酸酶I解決方案

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艾美捷Worthington脫氧核糖核酸酶I解決方案

更新日期:2022/6/21 17:16:51

所 在 地:中國(guó)大陸

產(chǎn)品型號(hào):

簡(jiǎn)單介紹:牛胰腺脫氧核糖核酸酶是種核酸內(nèi)切酶,它優(yōu)先分裂與嘧啶核苷酸相鄰的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生在 3´ 位置具有游離羥基的 5´-磷酸終止多核苷酸。

相關(guān)標(biāo)簽:脫氧核糖核酸酶I 

優(yōu)質(zhì)供應(yīng)

詳細(xì)內(nèi)容

 牛胰腺脫氧核糖核酸酶是種核酸內(nèi)切酶,它優(yōu)先分裂與嘧啶核苷酸相鄰的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生在 3' 位置具有游離羥基的 5'-磷酸終止多核苷酸。DNase I 由外分泌腺分泌,在胰腺和腮腺中含量高。它在其他組織中的含量也較低(Chen  Liao 2006,以及 Nadano 等人 1993)。

 

已知 DNase 參與細(xì)胞凋亡,并已被提議在細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白聚合的調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用。除了在分子生物學(xué)中的應(yīng)用外,DNase I 還被用于治療囊性纖維化和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Chen 和 Liao 2006)。

 

歷史:

1903 年,Araki 用肝臟、脾臟和胸腺組織的提取物將 α-核酸凝膠液化(Araki 1903 和 Kunitz 1950)。Plenge 在微生物中也表現(xiàn)出類似的活性(Plenge 1903)。1913 年,De la Blanchardière 開發(fā)了種用于胸腺 DNA 凝膠液化的檢測(cè)方法,并表明它不會(huì)伴隨 DNA 堿基的破壞(Kunitz 1950)。

 

在接下來的幾十年中,各種作者描述了切割核苷酸的酶,其名稱包括核酸酶 (Levene 和 Medigreceanu 1911)、核膠酶 (Feulgen 1923)、多核苷酸酶 (Levene 和 Dillon 1932)、脫氧核糖核酸多聚酶 (Greenstein 1943)、胸腺核酸多聚酶 (Laskowski 1946)、和脫氧核糖核酸酶 (McCarty 1946)。1950 年,庫(kù)尼茨先結(jié)晶并創(chuàng)造了天的名稱,脫氧核糖核酸酶。  

 

在 1970 年代初期,Salnikow 等人。發(fā)現(xiàn) DNase I 存在于四種同種型中,可通過其唾液酸含量區(qū)分(Salnikow 等人,1970)。不久之后,多肽鏈結(jié)構(gòu)被闡明(Salnikow et al. 1973b, Liao et al. 1973, and Catley 1973)。晶體結(jié)構(gòu)由 Suck 和 Oefner 在 1986 年以 2.0 Å 的分辨率確定,后來又進(jìn)行了改進(jìn)(Oefner 和 Suck 1986)。

 

1990 年,編碼牛胰腺 DNase IbpDNase I)的基因由合成寡核苷酸構(gòu)建,然后在大腸桿菌中克隆和表達(dá)(Worrall 和 Connolly 1990)。1992 年,以 2.3 Å 的分辨率獲得了 bpDNaseI-d(GGTATACC)2 復(fù)合物的 射線結(jié)構(gòu)(Weston 等人,1992)。1998 年,從 bp-cDNA 中克隆了 bpDNaseI 基因并在大腸桿菌中表達(dá)(Chen 等人 1998)。

 

天,研究人員繼續(xù)研究參與底物結(jié)合和催化活性的殘基 (Chen et al. 2008)、新型抑制劑 (Chen and Liao 2008)DNAse I 對(duì)特定 DNA 序列的特異性 (Heddi et al. 2010),以及蛋白質(zhì)-DNA 復(fù)合后 DNAse I 和 DNA 中發(fā)生的構(gòu)象變化(N'soukpoé-Kossi 等人,2008 年)。

 

艾美捷Worthington脫氧核糖核酸酶I特異性:

bpDNase I 不是堿基或序列特異性的;但是,它不會(huì)隨機(jī)切割。它顯示優(yōu)先在嘧啶的 5' 側(cè)進(jìn)行裂解,并且在替代共聚物中尤其明顯(Bernardi 等人 1975 和 Lomonossoff 等人 1981)。已經(jīng)表明,扭曲角的變化被 DNase I 識(shí)別(Dickerson 和 Drew 1981)。DNase I 的特異性還取決于存在的二價(jià)陽離子。在存在 Ca2+ 和 Mg2+ 的情況下,它會(huì)導(dǎo)致單鏈斷裂,而在存在 Mn2+ 的情況下會(huì)導(dǎo)致雙鏈斷裂(Junowicz 和 Spencer 1973,以及 Campbell 和 Jackson 1980)。

 

艾美捷Worthington脫氧核糖核酸酶I分子特征:

與人類、小鼠和大鼠類似,牛胰腺 DNase I 基因由 個(gè)外顯子組成,只有后 個(gè)外顯子編碼該蛋白質(zhì)(De María 和 Arruti 2003)。新生蛋白通過由外顯子二編碼的 22 個(gè)氨基酸信號(hào)序列引導(dǎo)至分泌途徑細(xì)胞器。主要活性位點(diǎn)殘基 H166 由外顯子 編碼(De María 和 Arruti 2003 和 Kraehenbuhl 等人 1977)。盡管牛和其他哺乳動(dòng)物的外顯子長(zhǎng)度幾乎相同,但內(nèi)含子的長(zhǎng)度差異很大。TATA 盒序列位于外顯子 上游 35 bpDe María 和 Arruti 2003)。已經(jīng)提出影響編碼序列的多重剪接事件可能是下調(diào) DNase I 表達(dá)的機(jī)制(Liu 等人 1997)。

 

艾美捷Worthington脫氧核糖核酸酶I的應(yīng)用:

原代細(xì)胞分離中的 DNA 去除:降低粘度提供更好的產(chǎn)量

生物加工應(yīng)用中的 DNA 去除

 RT-PCR 之從 RNA 制劑中去除基因組 DNA

體外轉(zhuǎn)錄

尼克翻譯

DNA酶足跡

肌動(dòng)蛋白結(jié)合

蛋白質(zhì)與核酸的紫外交聯(lián)

放射性標(biāo)記

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