艾美捷 RBOHD |呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D應(yīng)用案例：

從Col-0（野生型）和rbohd空突變體（Nühse et al.，2007）的10或12株7日齡擬南芥幼苗中分離出總蛋白。16µl總蛋白在65°C下變性5分鐘，在8%SDS-PAGE上分離。并在55V電壓下使用槽式傳輸系統(tǒng)傳輸70分鐘至硝化纖維素膜。用1xPBS+0.1%吐溫20+5%牛奶（PBS-T）或TBS+0.1%吐溫20（TBS-T）+5%牛奶在室溫（RT）下攪拌2小時(shí)阻斷印跡。抗體按指示分別稀釋至1:2500和1:5000，并在4℃下在1xPBS-T pr TBS-T+5%牛奶中攪拌培養(yǎng)。傾析抗體溶液，在RT條件下攪拌，在1xPBS-T或TBS-T中洗滌印跡3次（每次7分鐘）。根據(jù)制造商的建議，將二抗體山羊抗兔HRP結(jié)合物（AS09 602，Agrisera）稀釋至1:20000，并使用化學(xué)發(fā)光檢測試劑對(duì)印跡進(jìn)行培養(yǎng)。X射線膠片的曝光時(shí)間為2分鐘。作為同膜的對(duì)照部分，用抗CNX1/2抗體（AS12 2365，Agrisera）孵育。

RBOHD丨呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D相關(guān)研究工具介紹：

1、針對(duì)參與氧化應(yīng)激的蛋白質(zhì)的抗體的收集

2、植物蛋白提取緩沖液

3、二抗體

參考資料：

Nühse等人。質(zhì)膜蛋白的定量磷酸化蛋白質(zhì)組分析揭示了植物天然免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機(jī)制。植物J。2007年9月；51(5): 931–940.

Nga Nguyen、Kelly Mason和Antje Heese（密蘇里大學(xué)-哥倫比亞大學(xué)，密蘇里州，美國）提供

Agrisera公司提供的植物域的抗體涵蓋擬南芥、萊茵衣藻、藍(lán)藻、松柏類、硅藻、大豆、大麥、蒺藜苜蓿、煙草、稻、菜豆、小立碗蘚、楊樹、豌豆、番茄、馬鈴薯、菠菜、小麥、玉米、葡萄等多個(gè)物種。艾美捷科技是Agrisera的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的RBOHD丨呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D。