ELISpot與傳統(tǒng)ELISA區(qū)別（艾美捷整理如下）：

ELISpot實(shí)驗(yàn)步驟與原理示意 （示意圖如下）

大致原理上分為如下7個(gè)步驟，詳情已具體產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)

Step.1 包被：將單克隆捕獲抗體添加到乙醇處理的PVDF膜板上

Step.2 細(xì)胞孵育：在有刺激的情況下加入細(xì)胞，孵育，細(xì)胞分泌細(xì)胞因子

Step.3 捕獲分泌物：激活后的細(xì)胞，分泌的細(xì)胞因子被周圍的抗體結(jié)合捕獲

Step.4 檢測抗體：去除細(xì)胞，清洗平板，加入生物素化的檢測抗體

Step.5 鏈霉親和素-酶偶聯(lián)物：加入鏈霉親和素偶聯(lián)物，保證后續(xù)在膜上形成斑點(diǎn)

Step.6 加反應(yīng)底物：當(dāng)酶催化時(shí)，顯色底物形成不溶性沉淀

Step.7 結(jié)果分析：在自動點(diǎn)閱讀器中對結(jié)果進(jìn)行分析。每個(gè)斑點(diǎn)對應(yīng)個(gè)分析物分泌細(xì)胞

如何挑選合適的ELISpot試劑盒？

針對不同的研究需要，使用不同格式的ELISpot試劑盒，從ELISpotBASIC到完整的ELISpotPRO試劑盒。

艾美捷建議，根據(jù)用戶偏好，比如想要設(shè)置和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，開發(fā)kit的用戶，可使用ELISpot基礎(chǔ)自開發(fā)款，大部分客戶的選擇：ELISpotPLUS預(yù)包被，想要zui短的時(shí)間，就選ELISpotPRO步法。