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Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的使用方法

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Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的使用方法

更新日期:2023/2/6 16:51:24

所 在 地:中國大陸

產(chǎn)品型號:

簡單介紹:熒光金(Fluoro-Gold)抗體是一種在兔體內(nèi)培養(yǎng)的多克隆抗體。小瓶將含有約100μl的抗體溶液。

相關(guān)標(biāo)簽:熒光金 

優(yōu)質(zhì)供應(yīng)

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 艾美捷Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的儲存和制備

您將在一個(gè)小藥瓶中收到熒光金抗體。這是一種在兔體內(nèi)培養(yǎng)的多克隆抗體。小瓶將含有約100µl的抗體溶液。您不會收到冷凍的抗體,但應(yīng)立即冷凍并儲存在寒冷(-20ºC)、黑暗、干燥的環(huán)境中。一旦溶液解凍以準(zhǔn)備工作滴定度,不要再冷凍溶液。一臺好的商用冰箱的冷凍部分,沒有防凍功能,應(yīng)該足夠了。如果適當(dāng)且連續(xù)冷凍,抗體溶液可儲存長達(dá)一年。

 

抗體溶液應(yīng)保持冷凍,直到可以使用。100µl抗體等分試樣的稀釋度為1/100。抗體可在BSA稀釋劑(50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中進(jìn)一步稀釋1/50000至1/100000倍,以產(chǎn)生50ml至100ml的工作效價(jià)。這意味著你可以將收到的溶液稀釋500至1000倍。

 

如果您使用Vector精英套件,這將治療300至1000個(gè)切片。制備后,抗體溶液可在涼爽(4ºC)、黑暗和干燥的環(huán)境中儲存長達(dá)七天。好的商用冰箱的冰箱部分應(yīng)該足夠了。不建議在配制后七天內(nèi)使用該溶液。

 

Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的使用

氟金可以用幾種不同的方法注射,包括壓力法、離子電滲法和各種研究人員開發(fā)的其他應(yīng)用。參見Schmued和Fallon,F(xiàn)luoro-Gold:“一種具有眾多獨(dú)特財(cái)產(chǎn)的熒光逆行軸突示蹤劑”,《大腦研究》,377(1986)147-154,以及Pieribone和Aston-Jones,“熒光金在深部腦核傳入研究中的離子導(dǎo)入應(yīng)用”,《腦研究》,475(1988)259-271。許多研究人員開發(fā)了自己的改進(jìn)程序?贵w的使用不應(yīng)依賴于使用熒光金的方法。

 

注射Fluoro Gold后,將漂浮切片(使用了灌注了4%甲醛的大鼠的30μm切片)與Fluoro金抗體溶液在4℃下孵育過夜。將切片清洗,然后在生物素化GAR(Vector Labs)中以1/1000在室溫下孵育1小時(shí),然后再次清洗。然后將切片在Avidin/Biotin(Vector Labs)中以1/1000孵育1小時(shí),洗滌并轉(zhuǎn)移至二氨基聯(lián)苯胺(.04%)和氯化鎳(2.5%)中的0.1M乙酸鈉和0.06%H2O2中6分鐘。然后清洗、安裝、干燥、脫水并蓋上蓋子。

 

根據(jù)經(jīng)驗(yàn),如果按照上述方式儲存和制備,如果您使用Vector精英試劑盒,每小瓶抗體應(yīng)處理300至1000個(gè)30μm的白化大鼠腦(或類似大小的動物)切片。然而,您應(yīng)該嘗試集中注意力和程序,以確定哪一個(gè)適合您的環(huán)境。

 

熒光金(Fluoro-Gold)抗體根據(jù)不同規(guī)格分為單管和二管:

熒光金抗體-單管/100ul(FC20001)

熒光金抗體-2管/2x100ul(FC20002)

 

來源:https://www.amyjet.com/featured/Fluorochrome-Fluoro-Gold.shtml

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