INDIGO雌激素相關(guān)受體測(cè)定利用有的人類(lèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，該細(xì)胞被設(shè)計(jì)為提供人類(lèi)雌激素相關(guān)受體β（NR3B2）雜交形式的高水平表達(dá)。

該雌激素相關(guān)受體β（ERRβ）測(cè)定試劑盒是一種全方位螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告物測(cè)定系統(tǒng)，除ERRβ報(bào)告細(xì)胞外，還包括兩種用于細(xì)胞培養(yǎng)和稀釋用戶測(cè)試樣品的優(yōu)化培養(yǎng)基，參考反向激動(dòng)劑4-羥基他莫昔芬，用于制備熒光素素酶檢測(cè)試劑的試劑，以及詳細(xì)的協(xié)議。

ERRβ報(bào)告細(xì)胞使用INDIGO的有CryoMite制備™ 過(guò)程這種冷凍保存方法在解凍后產(chǎn)生高細(xì)胞活力，并提供了立即將健康、分裂合格的報(bào)告細(xì)胞分配到測(cè)定板中的便利。不需要中間的旋轉(zhuǎn)和洗滌步驟、活力測(cè)定或細(xì)胞滴度調(diào)整。

圖：人ERRβ的劑量反應(yīng)分析。ERRβ報(bào)告細(xì)胞用不同濃度的A處理。激動(dòng)劑GSK4716和DY131（Tocris）和B.反向激動(dòng)劑4-羥基他莫昔芬（提供）。平均相對(duì)光單位（RLU）及其對(duì)應(yīng)值分別測(cè)定了標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)百分比處理濃度（n=3）。折疊激活值（F/A）和折疊減少值（F/R）

在ERR中，β活性是通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)試中相應(yīng)的RLU值來(lái)計(jì)算的化合物處理過(guò)的報(bào)告細(xì)胞的RLU值與未處理的報(bào)告細(xì)胞相比。Z’值按照Zhang等人（1999）的描述計(jì)算.非線性回歸和

使用GraphPad Prism軟件進(jìn)行相應(yīng)的EC50和IC50測(cè)定。

Cayman Chemical 艾美捷該組件和儲(chǔ)存條件：

此人類(lèi)ERRβ檢測(cè)試劑盒包含執(zhí)行三組不同檢測(cè)的材料以96孔板格式。試劑的配置使得每組包含32個(gè)分析。然而，如果需要，可以組合試劑以進(jìn)行64或96次測(cè)定。報(bào)告細(xì)胞對(duì)溫度敏感！為了確保細(xì)胞管的大活力必須保持在-80°C，直到快速解凍程序之。

化驗(yàn)試劑盒在干冰上運(yùn)輸。收到后將其轉(zhuǎn)移至-80°C的倉(cāng)庫(kù)。如果您希望先檢查和清點(diǎn)各個(gè)套件組件，確保先轉(zhuǎn)移并將報(bào)告細(xì)胞管浸入干冰中。報(bào)告細(xì)胞的等分試樣作為一次性試劑提供。解凍后，細(xì)胞不能再冷凍，也不能在長(zhǎng)期培養(yǎng)中保持保持下游測(cè)定性能。因此，這些試劑的額外體積應(yīng)在化驗(yàn)設(shè)置后丟棄。

Cayman Chemical 該組件試驗(yàn)化合物的制備：

小分子測(cè)試化合物通常以高濃度溶劑化在DMSO中；理想情況下，1000倍的濃縮原液相對(duì)于測(cè)定。使用高濃度貯存物可大限度地減少DMSO帶入分析盤(pán)子。在建立分析之，使用兩種備選策略：

1.）化合物篩選介質(zhì)（CSM）可用作稀釋劑，進(jìn)行連續(xù)稀釋以獲得所需的終測(cè)定濃度系列。

2.）DMSO可用于連續(xù)稀釋?zhuān)瑥亩a(chǎn)生1000倍的濃縮每個(gè)獨(dú)立測(cè)試濃度的儲(chǔ)備。然后使用

CSM對(duì)制備的DMSO稀釋系列進(jìn)行終1000倍稀釋。無(wú)論使用何種稀釋方法，攜帶的DMSO總量的終濃度進(jìn)入分析孔的濃度不應(yīng)超過(guò)0.4%，預(yù)計(jì)高于0.4%。

注：CSM的配制有助于穩(wěn)定測(cè)定混合物的水環(huán)境。盡管如此在CSM中稀釋的疏水性測(cè)試化合物可能缺乏長(zhǎng)期特別是如果進(jìn)一步在低溫下儲(chǔ)存。因此，它建議立即在CSM中制備測(cè)試化合物稀釋液并且被認(rèn)為是“一次性”試劑。

Cayman Chemical涉及癌癥、腫瘤、氧化損傷、凋亡、氧化性損傷、代謝、內(nèi)分泌學(xué)等多種研究域。艾美捷科技是Cayman Chemical的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來(lái)源：https://www.amyjet.com/brand/cayman-china-distributor.shtml