人乳鐵蛋白ELISA是一種高度靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫測定（ELISA）人類生物樣品中乳鐵蛋白的測定。僅供研究使用。不用于診斷程序。

引言

乳鐵蛋白（LF）是一種具有抗菌活性的多功能鐵結(jié)合蛋白。它存在于牛奶和其他粘膜中分泌物。眾所周知，乳鐵蛋白是抵抗感染和炎癥的先天防御的一部分，也具有功能調(diào)節(jié)鐵吸收。

Kamiya艾美捷人乳鐵蛋白ELISA原理：

在該測定中，乳鐵蛋白存在于樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定儀表面的抗乳鐵蛋白抗體反應(yīng)

井。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，與辣根結(jié)合的抗乳鐵蛋白抗體過氧化物酶（HRP）。這些酶標(biāo)記的抗體與先結(jié)合的乳鐵蛋白形成復(fù)合物。在另一個洗滌步驟之后，通過添加顯色劑來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶底物，3,3＇，5,5＇-TMB。結(jié)合酶的數(shù)量直接隨測試樣品中的乳鐵蛋白；因此，在450nm處的吸光度是乳鐵蛋白濃度的量度測試樣品。測試樣品中乳鐵蛋白的量可根據(jù)以下公式構(gòu)建的校準(zhǔn)曲線進行插值：并對樣品稀釋進行校正。

Kamiya艾美捷人乳鐵蛋白ELISA試劑準(zhǔn)備：

1.濃縮稀釋劑

提供的稀釋劑溶液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:5。

2.濃縮洗滌液

提供的洗滌液為20X濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:20。結(jié)晶當(dāng)儲存溫度較低時，精礦中的形成并不罕見。將精礦加熱至稀釋30-35°C可溶解晶體。

3.酶抗體結(jié)合物濃縮物

通過添加10µL計算每個微量滴定板測試條所需的工作共軛溶液量酶抗體綴合物與990µL 1X稀釋劑，用于每個測試條。立即稀釋在使用，并防止光線照射。混合均勻，但要輕柔。避免起泡。

4.TMB基板溶液

隨附隨用。

5.停止解決方案

隨附隨用。

6.微量滴定板

隨附隨用。打開微量滴定袋并從袋中取出板。移除所有將不得用于分析，將其放回袋中，并與干燥劑一起重新密封。

7.人乳鐵蛋白校準(zhǔn)儀

將1.0mL蒸餾水或去離子水加入凍干人乳鐵蛋白校準(zhǔn)儀中，并輕輕混合直至溶解。校準(zhǔn)器現(xiàn)在的濃度為18.40µg/mL（重新配制的校準(zhǔn)器應(yīng)為如果打算將來使用，立即等分并冷凍）。需要準(zhǔn)備人乳鐵蛋白校準(zhǔn)品使用立即（見下表）。在每一步之間充分混合。避免起泡。

Kamiya基于免疫比濁技術(shù)的臨床診斷和研究免疫分析工具，用于脂質(zhì)評估、凝血、炎癥、糖尿病、營養(yǎng)評估和血清蛋白測量。艾美捷科技是Kamiya的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml