G 蛋白偶聯(lián)受體 (GPCR) 和離子通道在許多信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中發(fā)揮著重要作用，使它們成為治療和藥物發(fā)現(xiàn)的大靶點(diǎn)。有超過(guò) 350 種非嗅覺(jué) GPCR，它們是各種配體的受體，從小離子（例如，鈣、神經(jīng)遞質(zhì)、代謝物）到肽和糖蛋白激素。由于 GPCR 在許多疾病中發(fā)揮作用，包括癌癥、感染和炎癥，因此非常需要生產(chǎn)針對(duì)這些細(xì)胞表面信號(hào)傳遞受體蛋白的抗體。

挑戰(zhàn)：

與 GPCR 抗體開(kāi)發(fā)相關(guān)的挑戰(zhàn)涉及 GPCR 的多個(gè)跨膜區(qū)域的獨(dú)特特征。它們?cè)诩?xì)胞膜上只有個(gè)小的、暴露的親水區(qū)域，使抗體難以靶向。除了暴露的小表位區(qū)域外，開(kāi)發(fā)用于抗體開(kāi)發(fā)的 GPCR 抗原也是個(gè)挑戰(zhàn)。針對(duì)暴露的細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)區(qū)域開(kāi)發(fā)肽可用于抗體開(kāi)發(fā)；然而，由于 GPCR 和其他膜蛋白存在于親脂環(huán)境中，因此針對(duì)線(xiàn)性肽開(kāi)發(fā)的許多這些抗體可能不會(huì)與天然蛋白結(jié)合。此外，它們?cè)谕ǔl件下不溶，使得 GPCR 抗原很難重組表達(dá)并以可溶形式分離以用于傳統(tǒng)的體外測(cè)定。

艾美捷ProSci離子通道和GPCR家族成員等跨膜靶標(biāo)抗體開(kāi)發(fā)方案：

為了克服為流式細(xì)胞術(shù)或任何需要 GPCR 天然結(jié)構(gòu)的應(yīng)用開(kāi)發(fā)抗體的挑戰(zhàn)，保持 GPCR 的結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。這就是為什么我們從生成過(guò)表達(dá)細(xì)胞系開(kāi)始的原因，這些細(xì)胞系將在細(xì)胞表面包含更多的 GPCR。此外，ProSci不是用單蛋白質(zhì)進(jìn)行免疫，而是用完整的細(xì)胞進(jìn)行免疫，這增加了產(chǎn)生 GPCR 抗體的機(jī)會(huì)。

兔單克隆抗體因其高親和力和特異性而特別適合檢測(cè) GPCR。即使使用過(guò)表達(dá)細(xì)胞系來(lái)改善與分離 GPCR 抗原及其天然較低表達(dá)水平相關(guān)的挑戰(zhàn)，與其他抗原相比，GPCR 仍可能具有較低的表達(dá)水平。

因此，需要更有效的ProSci抗體來(lái)開(kāi)發(fā)在 IHC 等應(yīng)用中表現(xiàn)良好的抗 GPCR 抗體。用于重組兔單克隆抗體的篩選策略有利于選擇能夠與 GPCR 結(jié)合的理想抗體，作為具有高親和力、特異性和效力的完全成熟 B 細(xì)胞的漿細(xì)胞分離篩選。

ProSci的抗體大都經(jīng)免疫親和層析純化，具有高純度、高親和力、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，可用于免疫印跡（Western blot），免疫組織化學(xué)（IHC），免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC），酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）和細(xì)胞流式分析（FACS）等應(yīng)用。艾美捷科技是ProSci的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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