艾美捷Worthington 膠原酶解離酶背景：

細(xì)菌膠原酶是含有膠原酶的粗復(fù)合物，更準(zhǔn)確地稱為梭菌肽酶 A，它是種蛋白酶，對序列 Pro-X-Gly-Pro 中的 X-Gly 鍵具有特異性，其中 X 常見的是中性氨基酸。這種序列經(jīng)常在膠原蛋白中發(fā)現(xiàn)，但在其他蛋白質(zhì)中很少見。雖然許多蛋白酶可以水解單鏈、變性的膠原蛋白多肽，但梭菌肽酶 A 在蛋白酶中是獨(dú)無二的，因?yàn)樗軌蚬艉徒到饨Y(jié)締組織中常見的三螺旋天然膠原原纖維。

真正的膠原酶可以同時(shí)切割所有三個(gè)鏈或攻擊單鏈。哺乳動(dòng)物膠原酶在特定位點(diǎn)以天然三螺旋構(gòu)象分裂膠原蛋白，產(chǎn)生片段 TC A 和 TC B，代表原膠原分子的 3/4 和 1/4 長度。碎片化后，這些片段傾向于展開成隨機(jī)多肽，并且更容易受到其他蛋白酶的攻擊。

細(xì)菌膠原酶通常從宿主侵入菌株中提取。這些酶與哺乳動(dòng)物膠原酶的不同之處在于它們攻擊螺旋上的許多位點(diǎn)。Mandl 等人先制備的來自溶組織梭菌的膠原酶已經(jīng)得到了徹底的研究。市售膠原酶主要限于來自Cl 的膠原酶。盡管近有其他來源可用。梭菌膠原酶還優(yōu)先降解天然膠原蛋白中的螺旋區(qū)域，優(yōu)先在 Pro-X-Gly-Pro 序列中的 X-Gly 鍵處，其中 X 常見的是中性氨基酸。合成肽底物中的這種鍵也可能被分裂。

由于所有膠原多肽的不完全水解及其對細(xì)胞外基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的高濃度非膠原蛋白和其他大分子的有限活性，單獨(dú)純化的梭菌肽酶 A 通常在解離組織方面效率低下。常用于組織解離的膠原酶是含有梭菌肽酶 A 以及許多其他蛋白酶、多糖酶和脂肪酶的粗制品。粗膠原酶非常適合組織解離，因?yàn)槌怂饨Y(jié)締組織和上皮組織的細(xì)胞外基質(zhì)中的其他蛋白質(zhì)、多糖和脂質(zhì)的酶之外，它還含有攻擊天然膠原蛋白和網(wǎng)狀纖維所需的酶。

現(xiàn)在，艾美捷Worthington 的這四種情況分別是：

1、類型 1包含平均數(shù)量的測定活性（膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性）。般推薦用于上皮、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備。

2、2 型含有更大的梭菌蛋白酶活性。它通常用于心臟、骨骼、肌肉、甲狀腺和軟骨。

3、選擇3 型是因?yàn)榈鞍姿饣钚缘�。它通常用于乳腺�?xì)胞。

4、選擇4 型是因?yàn)橐鹊鞍酌富钚缘�。它通常用于胰島和其他受體完整性至關(guān)重要的應(yīng)用。

2007 年推出的無動(dòng)物源膠原酶（代碼 CLSAFA）源自在完全不含動(dòng)物成分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物，為必須防止引入潛在動(dòng)物源性病原體的生物加工應(yīng)用而設(shè)計(jì)。二蛋白酶的水平與 1 型和 2 型相似。

不同組織的類型和有效性之間的相關(guān)性很好，但并不完美，部分原因是使用參數(shù)可變。然而，大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。Worthington 膠原酶檢測的詳細(xì)描述以及梭菌肽酶 A 檢測程序可在Worthington 酶手冊中找到。

寫在后：如果你找到適合你的細(xì)胞分離程序的膠原酶類型之，你可能想嘗試 Worthington 的膠原酶采樣程序。這個(gè)免費(fèi)的程序讓研究人員可以對不同批次的膠原酶進(jìn)行預(yù)采樣，并在其特定應(yīng)用中對其進(jìn)行評估，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)量和活力的佳組合。

Worthington核心酶：包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml