5＇-磷酸吡哆醛是種必需的輔酶。通過利用在維生素 B6 缺乏培養(yǎng)基上生長的細(xì)胞制備的脫輔酶 (TYDAPO)，可以測定磷酸吡哆醛。參見 Umbreit等人。(1945) 和 Gunsalus 和史密斯 (1957)。放射性標(biāo)記的酪氨酸的脫羧作用允許測定更少量的磷酸吡哆醛（Maruyama 和 Coursin 1968；Sundaresan 和 Coursin 1970）。丙酮干燥的細(xì)胞被用作相對簡單的脫輔基酶提取和純化的來源。

全酶可用于以測壓法或比色法測定酪氨酸、苯丙氨酸和二羥基苯丙氨酸。Tashian (1957) 報道了基于此原理測定尿液中酪氨酸的方法。血漿苯丙氨酸也可以使用這種酶來測定。初的方法由 Udenfriend 和 Cooper (1953) 描述，修改已由 Hsia (1959) 和 Knox 和 Messinger (1958) 發(fā)表。Poisner (1960) 使用 Hsia 的方法測定了精神分裂癥患者的血清苯丙氨酸水平，結(jié)果顯著高于正常水平。

Boeker 和 Snell (1972) 對氨基酸脫羧酶進(jìn)行了綜述。另見 Snell 和 DiMari (1970)。

艾美捷Worthington 糞鏈球菌酪氨酸脫羧酶的特征：

佳 pH 值：5.5（Boeker 和 Snell 1972）。

特異性：L-苯丙氨酸和二羥基苯丙氨酸的作用速度比 L-酪氨酸慢得多。

抑制劑：重金屬（Ag +、Cu 2+、Fe 2+、Fe 3+、Pb 2+）KCN、NHOH、N 2 H 4和SO 4=。

穩(wěn)定劑：甘油 10-25%、巰基乙醇 (5 mM) 和 L-酪氨酸 (0.5 mM) (Chabner ａnd Livingston 1970; Sundaresan ａnd Coursin 1970)。

艾美捷Worthington酪氨酸脫羧酶測定方法：

此處使用的測定法基于 Gunsalus 和 Smith 的測定法（酶學(xué)方法，III，（Colowick, S. 和 Kaplan, N. 編輯），Academic Press, NY, 963, 1957）。在指定條件下，個單位在 37°C 和 pH 5.5 條件下每分鐘從 L-酪氨酸 產(chǎn)生 1 微摩爾 CO 2 。

試劑：

1.0.8 M 醋酸鈉，pH 5.5

2.0.074 M 醋酸鈉，pH 5.5

3.0.0065 M L-酪氨酸在試劑水中。邊攪拌邊加熱至 80°C 溶解。平衡至 37°C。（如果溶液冷卻，可能會形成晶體）。

酶：

將酶溶解在 0.074 M 乙酸鈉，pH 5.5 中，濃度為 2 mg/ml。在取出等分試樣立即混合均勻。

程序：

將以下移液器移入 Warburg 燒瓶的主孔中：

0.8 M 醋酸鈉，pH 5.5 0.2 毫升

0.0065 M L-酪氨酸，37°C 2.3 毫升

移取 0.5 ml 酶懸浮液到燒瓶的側(cè)臂中。包括個不含酶的燒瓶作為空白，個不含酶的燒瓶作為空白，個裝有 3.0 ml 試劑水的燒瓶作為熱氣壓計。將燒瓶連接到壓力計。平衡 10 分鐘后，關(guān)閉壓力計，傾倒并混合底物，然后更換浴中的燒瓶。

確定以大約 5 分鐘間隔釋放 30 分鐘的 CO 2微摩爾數(shù)。繪制釋放的微摩爾 CO 2與反應(yīng)時間的關(guān)系，并從曲線的線性部分確定每分鐘釋放的微摩爾。

Worthington核心酶：包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml