喬利等人。(1974) 將其稱為氧和 4 電子轉(zhuǎn)移酚氧化酶。它負責整個系統(tǒng)發(fā)育規(guī)模的褐變反應(yīng)。盡管已經(jīng)純化了粗糙脈孢菌的酪氨酸酶（Fling et al . 1963），但大部分工作都是用蘑菇酶完成的，盡管產(chǎn)量和致性都很差；Smith ａnd Krueger (1962) 證明了它的多樣性。Bouchilloux等人。(1963) 獲得了四種酶。

艾美捷Worthington 蘑菇多酚氧化酶的特性：

分子量：128,000 (Duckworth ａnd Coleman 1970)。

組成：該酶是種四聚體，每個分子含有 4 克銅原子 (Jolley et al . 1974)，以及包括酚底物在內(nèi)的芳香族化合物的兩個結(jié)合位點。還有個明顯不同的氧結(jié)合位點，即銅位點（Duckworth ａnd Coleman 1970）。銅可能處于亞銅狀態(tài)；該酶的失活與Cu 2+的增加有關(guān)。（Kertész等人，1972 年）。氨基酸組成已確定。Jolley等人報道了廣泛的結(jié)構(gòu)研究。（1969）；和達克沃斯和科爾曼（1970）。另見 Jolley等人。（1972 年、1973 年和 1974 年）。

佳 pH 值：6.0-7.0。

消光系數(shù)：消光系數(shù)= 24.9（純化后立即）（Duckworth 和 Coleman 1970）。

抑制劑：與銅絡(luò)合的化合物。該酶還被苯甲酸對兒茶酚 對氧的競爭性抑制（Duckworth 和 Coleman 1970）。

艾美捷Worthington 多酚氧化酶活性：

多酚氧化酶是種氧轉(zhuǎn)移酶。除了使用 O 2催化鄰苯二酚脫氫生成鄰醌和苯酚鄰羥基化生成鄰苯二酚外，Strothkamp 和 Mason (1974) 還報道了過氧化物酶活性。Kertész等人已經(jīng)報道了動力學研究。（1971）。另見 Malmström 和 Rydén 的評論。

特異性：大量對位取代的兒茶酚被氧化（Duckworth 和 Coleman 1970）。

穩(wěn)定性：凍干制劑在 -20°C 下可穩(wěn)定保存 6-12 個月。

艾美捷Worthington 多酚氧化酶測定：

方法：多酚氧化酶將酪氨酸氧化為二羥基苯丙氨酸，二羥基苯丙氨酸又被氧化為鄰醌。后者伴隨著 280 nm 處吸光度的增加。增加的速率與酶濃度成正比，并且在初始滯后后的 5-10 分鐘內(nèi)呈線性關(guān)系。在指定條件下，在 25°C、pH 6.5 下，個單位在 280 nm 處引起每分鐘 0.001 的吸光度變化。

試劑：

0.5 M 磷酸鉀緩沖液，pH 6.5

0.001 M L-酪氨酸

酶：

以 1 mg/ml 的濃度溶解在試劑水中。在試劑水中進步稀釋至 200-400 單位/毫升的濃度。

程序：

將分光光度計調(diào)整到 280 nm 和 25°C。將移液器移入每個比色皿，如下所示：

0.5 M 磷酸鹽緩沖液，pH 6.5 1.0 毫升

0.001 M L-酪氨酸 1.0 毫升

試劑水 0.9 毫升

通過毛細管將氧氣鼓泡到比色皿中 4-5 分鐘，使該反應(yīng)混合物充氧。將比色皿轉(zhuǎn)移到分光光度計并記錄 A 280 4-5 分鐘以達到溫度平衡并確定空白率（如果有）。加入 0.1 ml 適當稀釋的酶，記錄 A 280 10-12 分鐘。從曲線的線性部分確定 ΔA 280 。預(yù)計會有 2-3 分鐘的非線性“滯后”。

Worthington核心酶：包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml