產(chǎn)品展示
Worthington果膠酶的特性及測定方案
點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/7/26 17:02:35
更新日期:2022/7/26 17:02:35
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
主要的:
果膠裂解酶 (4.2.2.10)
多聚半乳糖醛酸酶 (3.2.1.15)
半乳聚糖 1,4-α-半乳糖醛酸酶 (3.2.1.67)
次要的:
纖維素酶(內(nèi)切纖維素酶(3.2.1.4)、外切纖維素酶( 3.2.1.91) 、纖維二糖酶(3.2.1.21))
半纖維素酶 (3.1.1.73)
果膠酯酶 (3.1.1.11)
木聚糖酶 (3.2.1.8)
艾美捷Worthington 黑曲霉果膠酶的特性:
除了其高酶活性外,純化的果膠酶還門用于植物原生質(zhì)體培養(yǎng)研究。使用定量測量D-半乳糖醛酸從多聚半乳糖醛酸中釋放的方法測定酶。該方法基于使用鹽酸新銅堿顯色試劑測定法測定還原糖。當與 Worthington 純化的纖維素酶起使用時,已發(fā)現(xiàn)純化的果膠酶可用于在幾種植物系統(tǒng)(例如玉米、大豆、紅甜菜、向日葵、番茄和柑橘)中產(chǎn)生良好產(chǎn)量的活原生質(zhì)體。般來說,濃度范圍為 0.1% 至 0.5% 的果膠酶(伴隨著 0.5% 至 1.5% 的纖維素酶)在 24°C 至 37°C 下使用 1 至 16 小時會產(chǎn)生良好的效果。
儲存: 儲存于 2-8°C。防潮。如果不次使用整個瓶子,在到達時稱重成次性等分試樣,并蓋緊、干燥、冷藏保存。材料非常吸濕,如果暴露在濕氣中會變得發(fā)粘且難以稱重。
穩(wěn)定性/儲存: 防潮。如果不次使用整個瓶子,在到達時稱重成次性等分試樣,并在 2-8°C 下蓋緊并干燥儲存。材料非常吸濕,如果暴露在濕氣中會變得發(fā)粘且難以稱重。
單位定義:個單位在 37°C、pH 5.0 下每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放 1µmole D-半乳糖醛酸。
技術(shù)說明:果膠酶具有J強的吸水性;儲存干燥以防受潮。
艾美捷Worthington果膠酶的測定:
方法:在 37°C,pH 5.0 條件下,個單位每分鐘從聚半乳糖醛酸中釋放 1 umole D-半乳糖醛酸。
試劑:
0.1 M 檸檬酸/磷酸鹽緩沖液(測定緩沖液),pH 5.0
顏色試劑 A:將 40g 無水 Na 2 CO 3溶解 在 600 ml 試劑 H 2 O 中。加入 16 g 甘氨酸并攪拌直至溶解。加入 0.450 gm CuSO 4 5H 2 O,攪拌至溶解。用試劑 H 2 O 加至 1 升。
顏色試劑 B:將 1.2 g neocuprine - HCl 溶解在 1 升 H 2 O 試劑中。在 4°C 下儲存在棕色瓶中。
D-半乳糖醛酸標準品,1mg/ml
0.5% 聚半乳糖醛酸底物:
在熱板上加熱 500 ml 檢測緩沖液。在加熱和攪拌的同時,緩慢加入 2.5 gm 聚半乳糖醛酸。加熱并攪拌直至溶解。它會有點粘稠和不透明。不要讓溶液沸騰。如有必要,冷卻并恢復(fù)音量。儲存于 4°C。
酶:
每天化妝新鮮。將溶液放在冰上直至使用。在檢測緩沖液中連續(xù)稀釋至 0.01 mg/ml。
程序:
準備三個試管,每個試管含有 1 ml 緩沖液和 6 ml 底物(試劑空白)。準備三個試管,每個試管含有 6 ml 底物和 1 ml 0.1 mg/ml 的酶樣品(測試)。準備三個試管,每個試管含有 6 ml 緩沖液和 1 ml 濃度為 0.1 mg/ml 的酶樣品(樣品空白)。
將試管在 37°C 水浴中孵育 60 分鐘 ± 1 分鐘。使用 10 μg 至 125 μg 的 D-半乳糖醛酸標準品將標準曲線管分裝,式三份。
試管孵育 60 分鐘后,立即將支架放入冰水中以停止反應(yīng)。從每管 100 μl 中分裝到另組管中(也在冰上)。向每個反應(yīng)管和標準管中加入 2 ml Color Reagent A 和 2 ml Color Reagent B。倒置充分混合。將機架放入沸水浴中 13 分鐘 ±1 分鐘。冷卻試管,然后加入 2ml H 2 O。倒置充分混合。使用次性比色皿讀取 A 450與水空白的吸光度。不要使用流通池;橙色附著在玻璃上。計算每組式三份的平均吸光度。
計算:
繪制標準曲線:
計算變化率。曲線應(yīng)該是線性的,直到 100 ug D-半乳糖醛酸,如果不是,用新鮮試劑重復(fù)曲線。
Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。