微球菌核酸酶催化 DNA 和 RNA 的切割以產(chǎn)生 3＇-核苷酸。它具有外切和內(nèi)切 5＇-磷酸二酯酶活性。該酶在富含腺苷酸或尿苷酸和脫氧腺苷酸或胸苷酸的位點(diǎn)催化 RNA 和 DNA 的優(yōu)先內(nèi)切水解。該酶的分子量為 16,807 道爾頓，并且依賴于鈣。佳 pH 值為 9.2，但會(huì)根據(jù)存在的離子鈣濃度而變化。

單位定義：個(gè)單位對(duì)應(yīng)于在 37°C、pH 8.0、260 nm 處光密度變化 1.0，使用 DNA 作為底物。

艾美捷Worthington核酸酶、微球菌相關(guān)研究：

白蛋白，無核酸酶 (BSANF)

脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

E•RASE RNase A/T1 Blend (RCT)

組蛋白 (H, NHL)

溶菌酶 (LY/LYSF)

核酸酶，S1 ( SINUC/SINUCL)

核酸、DNA、大腸桿菌、λ/片段、RNA

磷酸酶、堿性 (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)

磷酸二酯酶 I (VPH)

磷酸二酯酶 II (SPH)

蛋白酶 K (PROK/PROKS)

反向轉(zhuǎn)錄酶，重組 HIV (RTHIV)

核糖核酸酶 A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)

核糖核酸酶 T1，無動(dòng)物源 (RT1S)

艾美捷Worthington核酸酶、微球菌測(cè)定：

方法：基本上是 Heins等人所描述的。(1966) 基于核酸酶消化 DNA 后酸溶性寡核苷酸的釋放。個(gè)單位對(duì)應(yīng)于在 37°C 和 pH 8.0 在指定條件下在 260 nm 處的 1.0 光密度變化。

試劑：

0.1 M 硼酸鈉，pH 8.8

0.01 M 氯化鈣

DNA，2.5 mg/ml：將 25 mg Worthington 小牛胸腺 DNA 溶解在 10 ml 0.01 M NaCl 中制備。在室溫下靜置過夜，然后緩慢攪拌以產(chǎn)生溶液。

7% 高氯酸

0.1% 牛血清白蛋白

酶：

以 1 mg/ml 溶解在試劑水中。在 0.1% 白蛋白中稀釋至 0.001-0.002 mg/ml 用于測(cè)定。

方程

程序：

如下移液器進(jìn)入 5 個(gè)編號(hào)的試管中的每個(gè)：

0.1 M 硼酸鈉，pH 8.8 0.1 毫升

0.01 M CaCl 2 0.05 毫升

0.25% DNA 0.1 毫升

在 37°C 水浴中孵育 6-7 分鐘以達(dá)到溫度平衡。在 0.001-0.0002 mg/ml 范圍內(nèi)制備至少四種不同的酶稀釋液。每隔段時(shí)間，將 0.1 ml 適當(dāng)稀釋液移入相應(yīng)的試管中，并在水浴中更換。向作為空白的第五個(gè)添加 0.1 ml 0.1% 白蛋白。孵育 30 分鐘。通過添加 0.5 ml 7% 高氯酸以定時(shí)間隔停止反應(yīng)。將試管置于冰浴中 10 分鐘，然后加入 2.7 ml 試劑水。在臨床離心機(jī)上以高速度離心 15 分鐘。抽出上清液并讀取 A 260與空白對(duì)照。

注意：為獲得佳結(jié)果，應(yīng)稀釋樣品以使終 A 260介于 0.2-0.9 之間。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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