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技術(shù)文章

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求

點(diǎn)擊次數(shù):505 發(fā)布時間:2008/11/21 16:01:11

通用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)可能會深入到每一個技術(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室.是一個潛在發(fā)展的市場.應(yīng)當(dāng)引起裝備管理方面的高度重視。在明確實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)定位、主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的前提下,轉(zhuǎn)頭形式、rcf、rpm、樣品量等是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù).要在此基礎(chǔ)上考慮離心機(jī)的選型、主要功能及兼顧功能的配置

21 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求

211 RNA 離心制備

培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)低速離心f水平轉(zhuǎn)頭.300xg)完成細(xì)胞分離、裂解后。加RNA沉淀提取液,于4~C,1000012000xgf角轉(zhuǎn)頭.微量1520 ml Eppendorf管;≥15 ml、50 ml)分步提取;組織樣本需先施勻漿預(yù)處理

212 DNA離心制備

水平轉(zhuǎn)頭.2 000xg左右(1520 ml Eppendorf管。15 HIl、50 HIl錐底管或更大體積);再經(jīng)1200027000xg。制備質(zhì)粒DNA:角轉(zhuǎn)頭,250 ml500ml/瓶。50006000Xg;1550 ml/管,1200027000xg4~C或特定溫度。

213 載體表達(dá)蛋白分離

角轉(zhuǎn)頭。250500 ml/瓶,4000xg;1550 ml錐底管,3000xg;角轉(zhuǎn)頭,5O Inl管/瓶,27000~g;4~C。

214 細(xì)胞純化和亞細(xì)胞器分離

用差速離心法分離細(xì)胞器和大小差別懸殊的細(xì)胞。由低速分步到高速離心.細(xì)胞器的沉降順序是細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體,所有過程控溫4 。收集細(xì)胞:水平轉(zhuǎn)頭,8501850xg。優(yōu)選錐形底管;分離細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),3300xg;核提取,25000xg。進(jìn)一步純化分離將聯(lián)用超速離心 密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器 采用合適的密度梯度介質(zhì)。水平轉(zhuǎn)頭100900xg。等密度梯度法分離細(xì)胞器.1000030000xg

215 細(xì)胞學(xué)涂片離心

除專用細(xì)胞涂片離心機(jī)外.在個別實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)上可配置細(xì)胞學(xué)涂片離心轉(zhuǎn)頭.實(shí)現(xiàn)一次1>4片離心。據(jù)細(xì)胞學(xué)特性,rcf控制在501000~g。選購時.需注意離心容器的樣品處理量是否滿足實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>

216 離心超濾、濃縮、抽提

配合市售離心過濾濃縮管f158O mlComing,Millipore,Spectrum)或樣品抽提容器使用。采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭 角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化:100012000xg不等.可參考所購容器的使用說明

217 微孔板離心

酶標(biāo)板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心。在通用離心機(jī)可通過在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架(rcf一般將低于轉(zhuǎn)頭的額定值1或選用微板專用離心轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn).1O00xg左右 每個吊架可放14塊標(biāo)準(zhǔn)96L板或更多,也有可兼做載玻片的離心適配器

 

 

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原創(chuàng)作者:凱達(dá)離心機(jī)世界

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