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新型離心技術(shù)(一)

點擊次數(shù):445 發(fā)布時間:2008/12/26 15:39:35

德國賀利氏分離技術(shù)公司自從專業(yè)制造實驗室離心機(jī)的近40年以來,始終在歐洲占地位。目前賀利制造的離心機(jī),從*簡單的小型臺式離心機(jī),到*尖端的、用現(xiàn)代化微處理機(jī)控制的冷凍超速離心機(jī)。

1.以連續(xù)流動離心法,實驗室規(guī)模從肉汁培養(yǎng)液申收集細(xì)菌

賀利氏離心機(jī)300MD系統(tǒng)以冷凍、高速、臺式離心機(jī)Contifuge 17RS與鋁合金或鈦的連續(xù)流動轉(zhuǎn)頭相結(jié)合為基礎(chǔ)而構(gòu)成。兩種轉(zhuǎn)頭的沉淀容量都有300ml,鈦轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速是15000rmin。

可移動的Contifuge 300MD系統(tǒng)由配備有自動控制蠕動泵的高速冷凍臺式離心機(jī)Contifuge 1 7RS所組成。蠕動泵裝在安放離心機(jī)的手推車上。如果需要,這個裝置還可配上溫度范圍由-1 5120"C的穿流冷卻器、容量為10的玻璃接收容器以及磁攪拌器。由于Contifuge 300MD具有可移動性和結(jié)構(gòu)緊湊等優(yōu)點,它才能由一個發(fā)酵器或生物反應(yīng)器轉(zhuǎn)移到下一個發(fā)酵器或生物反應(yīng)器,可以在現(xiàn)場收集細(xì)菌。例如,這個系統(tǒng)可以在40分鐘內(nèi)由20細(xì)菌培養(yǎng)液中收集到大腸桿菌,清出率達(dá)98%。

鈦連續(xù)流動轉(zhuǎn)頭由旋轉(zhuǎn)鼓和固定的聯(lián)接器所組成,用1個滾珠軸承將它們同軸地連接在一起。細(xì)菌懸浮液通過中央導(dǎo)管進(jìn)入轉(zhuǎn)頭.并經(jīng)由錐形槽縫流入轉(zhuǎn)鼓。細(xì)菌就沿著鼓壁沉淀下來。澄清的培養(yǎng)肉汁則由1個帶排水口的刮盤出轉(zhuǎn)頭,并通過聯(lián)接器送出去。轉(zhuǎn)頭的旋轉(zhuǎn)和固定部分相互間是密閉的,以甘油作為液體密封,甘油也保護(hù)了轉(zhuǎn)頭內(nèi)的食物免遭環(huán)境大氣污染。

已做過的若干實驗可說明各種不同的細(xì)菌浮液在不同的流動速度下的清出程度。在實驗中,Contlfuge 300MD系統(tǒng)的鈦連續(xù)流動轉(zhuǎn)頭的通過蠕動泵連續(xù)地注入細(xì)菌懸浮液的同時,都以4 O00rmin的速度在旋轉(zhuǎn)著。當(dāng)離心溫度設(shè)定為4時,細(xì)菌懸浮液不需要預(yù)冷。裝滿的轉(zhuǎn)頭加速到15 O00rmin時,就可收集細(xì)菌了。分離后,轉(zhuǎn)頭停止旋轉(zhuǎn)并將它取出離心機(jī)。排去多余的液體,就可輕而易舉地打開轉(zhuǎn)頭。刮出轉(zhuǎn)頭壁上的細(xì)菌沉淀,就可用來做研究了。

將生長得很好的大腸桿菌培養(yǎng)液種到20Luri Bertani培養(yǎng)基中,在30保溫,到波長576nm的光密度達(dá)到12為止。改變?nèi)鋭颖玫倪M(jìn)料速度,就可得到程度不同的清出效果。含有大量酵母浸液或其它復(fù)雜添加物的肉汁培養(yǎng)在生長和離 L-時很容易起泡沫。這時,由于所選用的菌株產(chǎn)生出氣體,就會增加泡沫的形成。但Contifuge 300MD的清出能力卻不受其影響。

伍德氏醋酸桿菌(, cetobacteriura Wooddid20古有2 酵母浸液的礦質(zhì)培養(yǎng)基中厭氧生長。在30''C培養(yǎng)到波長578nm的光密度為11時為止。伍德氏醋酸桿菌是橢圓形到桿形的細(xì)菌。它們有一或兩條近端鞭毛,因此極富運動性,一般認(rèn)為很難分離。然而Contifuge300MD卻可以收集,即使更小且運動性的細(xì)菌同樣不降低清出率。

顯而易見,連續(xù)流動離心適用于大多數(shù)細(xì)菌培養(yǎng)物,也可以選用來進(jìn)行較大體積的收集工作。

適用于20L發(fā)酵器的下游加工的*新開發(fā)出的離心機(jī)是將連續(xù)流動離心機(jī)Contifuge300MD1個橫向流動的超濾設(shè)備結(jié)合而成,這樣就可以由發(fā)酵器培養(yǎng)物中濃縮胞外酶。

與傳統(tǒng)的方法相比較,將連續(xù)流動離心法和橫向流動超濾法結(jié)合成為一個連續(xù)的過程就具有下列優(yōu)點:

1. 縮短了操作時間;

2. 大為減少了所需要的膜面積;

3. 減少了裝填體積以及*終濃縮物的量。

濃鰭淀粉酶的實驗結(jié)果是

總的起始體積 2O升;

*鰹體積02;

總產(chǎn)率 70%

全過程耗時 4小時。

 

 

湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司
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原創(chuàng)作者:凱達(dá)離心機(jī)世界

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