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染料法絲狀支原體絲狀亞種實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒
Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides SC
貨號(hào):Mqs-msc-20 規(guī)格:20個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Mqs-msc-50 規(guī)格:50個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Mqs-msc-100 規(guī)格:100個(gè)反應(yīng)
儲(chǔ)存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反復(fù)凍融。
試劑盒特點(diǎn):
1, 特異性檢測(cè)絲狀支原體絲狀亞種,與其他生物基因組沒有交叉反應(yīng)。
2, 靈敏度高,檢測(cè)極限相當(dāng)于7-13個(gè)CFU/反應(yīng)。
3, 采用熱啟動(dòng)DNA聚合酶,可抑制非特異性擴(kuò)增,降低背景熒光。
4, 帶有陽性對(duì)照樣品(組分C),可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。
5, 帶有ROX參比染料,幫助校正加樣誤差和管間差異。
絲狀支原體絲狀亞種小克隆(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC,簡(jiǎn)稱MmmSC)是絲狀支原體族的一員。由于絲狀支原體絲狀亞種大克隆(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides LC,簡(jiǎn)稱MmmLC)已被重新歸類為絲狀支原體山羊亞種(Mycoplasma mycoides subsp. capricolum),因此,絲狀支原體絲狀亞種(Mycoplasma mycoides subsp. mycoides,簡(jiǎn)稱Mmm)僅剩MmmSC。
MmmSC于1898年首次發(fā)現(xiàn),是牛傳染性胸膜肺炎(CBPP,一種嚴(yán)重的呼吸道傳染。┑闹虏【憩F(xiàn)為血清纖維蛋白化、間質(zhì)性肺炎和肺部骨壞死,是養(yǎng)牛業(yè)的主要威脅,在流行區(qū)域可造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。受限于缺乏小型動(dòng)物的疾病模型,其致病機(jī)制仍不清楚,其細(xì)胞表面的多糖抗原可能是致病因素。歐洲菌株在發(fā)病率和致死率上低于非洲菌株,可能與其釋放過氧化氫較少有關(guān)。在疾病流行的初期,以急性和亞急性發(fā)病為主,隨后轉(zhuǎn)向慢性發(fā)展。
MmmSC體外培養(yǎng)較為容易,使用液體或固體瓊脂培養(yǎng)基,根據(jù)底物利用度、生長抑制和免疫熒光等進(jìn)行生化和血清學(xué)鑒定。補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)是目前的主要鑒定方法,適合在疾病急性發(fā)展階段進(jìn)行檢測(cè),但不太適合在疾病早期和慢性發(fā)展階段的檢測(cè),而且操作復(fù)雜,耗時(shí)且昂貴,很難精確且連續(xù)的獲取可靠的結(jié)果。凝集測(cè)定實(shí)驗(yàn)比較快速,但是靈敏度和特異性較低。免疫印跡和ELISA方法則容易出現(xiàn)交叉反應(yīng),且操作復(fù)雜,耗時(shí)較長。PCR是*快速和*有效的方法,有更高的靈敏度和更強(qiáng)的特異性,僅需幾個(gè)小時(shí)即可獲得結(jié)果。定量PCR法與普通PCR法相比,不僅可以精確定量,而且操作更為方便,更少受環(huán)境污染的影響。
由于其他的PCR方法多選擇一些變異很少的靶點(diǎn)區(qū)域,本試劑盒通過將MmmSC與親緣關(guān)系*近的MmmLC的基因組進(jìn)行比較,選取一段變異較多的區(qū)域作為靶點(diǎn),特異性識(shí)別MmmSC,經(jīng)BLAST驗(yàn)證,與其他生物基因組沒有交叉反應(yīng)。本試劑盒檢測(cè)了分布范圍或親緣關(guān)系較近的8種支原體共36個(gè)菌株,未發(fā)現(xiàn)非特異信號(hào)。
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