雙重探針法人類脲原體實時定量PCR試劑盒

Duplex Probe Real-time PCR Kit for Ureaplasma parvum & Ureaplasma urealyticum

貨號：Mqt-upr-20      規(guī)格：20個反應(yīng)

貨號：Mqt-upr-50      規(guī)格：50個反應(yīng)

貨號：Mqt-upr-100     規(guī)格：100個反應(yīng)

儲存：-20度，避光保存，有效期年。避免反復(fù)凍融。

試劑盒特點：

1， 特異性檢測并區(qū)分微小脲原體和解脲脲原體，可識別人類脲原體的全部十四種血清型，與其他生物基因組沒有交叉反應(yīng)。

2， 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強和熱穩(wěn)定性好的特點；采用熱啟動方式，可抑制非特異性擴增，降低背景熒光。

3， 帶有陽性對照樣品（組分C），可用于檢驗試劑盒有效性。

4， 帶有dUTP和UDG酶，可降低殘留DNA的污染。

脲原體（Ureaplasma）是類具有尿素分解能力的支原體，呈球狀或球桿狀，革蘭氏陽性，克隆呈煎蛋狀，細胞直徑在0.1到1.0 µm 之間，于1954年次從人類泌尿生殖道分離出來，1974年先被命名為解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum），人類中目已知有14種血清型。經(jīng)過多年的爭論，在2002年，根據(jù)基因組大小、16S rRNA基因序列、16S-23S rRNA基因間隔區(qū)序列、酶的多態(tài)性、DNA-DNA雜交、對錳的分化反應(yīng)、多帶抗原基因等，將其區(qū)分為兩種生物：解脲脲原體和微小脲原體（Ureaplasma parvum）。區(qū)分后的解脲脲原體包含的血清型有十種：2、4、5、7、8、9、10、11、12和13，微小脲原體包含的血清型有四種：1、3、6和14。不同血清型對人體疾病的影響目尚沒有致結(jié)論。這兩種脲原體是健康人常見的泌尿生殖道共生菌，可以單獨或共同存在，有時也會與些疾病相關(guān)聯(lián)，如：尿道炎、產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎、絨毛膜羊膜炎、自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、低出生體重、肺炎、菌血癥、腦脊膜炎和早產(chǎn)兒慢性肺病等。目尚不清楚這些脲原體會在什么情況下引起疾病，體液免疫系統(tǒng)健全的人般不會受其影響。

脲原體的體外培養(yǎng)非常困難，耗時較長，靈敏度較低。對脲原體的分型是依靠針對全細胞或純化抗原的單克隆或多克隆抗體，實驗方法包括：生長抑制實驗、代謝抑制實驗、免疫熒光、免疫過氧化物酶、ELISA、免疫印跡等，這些方法都比較耗時費力，結(jié)果常常難以重復(fù)，有很多交叉反應(yīng)，在含有多個血清型的樣本上常難以區(qū)分。而PCR法用于檢測脲原體，則有更高的靈敏度和更好的特異性，不受其他微生物污染的影響，且檢測時間短，僅需幾個小時即可獲得結(jié)果。定量PCR法與常規(guī)PCR法相比，不僅可以精確定量，而且操作更為方便，更少受環(huán)境污染的影響。

本試劑盒選擇脲原體特征性的尿素酶基因作為靶點，將脲原體14種血清型的序列進行比對，設(shè)計引物和探針，特異性識別并區(qū)分解脲脲原體和微小脲原體。使用本試劑盒可以準確區(qū)分脲原體14種血清型的生物分類，經(jīng)BLAST驗證，與其他生物基因組沒有交叉反應(yīng)。對42個分離培養(yǎng)樣本進行檢測，得到37個微小脲原體陽性，4個解脲脲原體陽性，以及個雙重陽性，與測序結(jié)果完全致。對31個臨床拭子樣本進行檢測，獲得11個微小脲原體陽性，6個解脲脲原體陽性，與常規(guī)PCR法檢測結(jié)果致，陽性率高于體外培養(yǎng)法，顯示本試劑盒靈敏度高于體外培養(yǎng)法。

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